CEP33779通过影响JAK2与转化生长因子β 1的串话机制来减轻类风湿关节炎大鼠相关肺纤维化的实验研究

摘要：

目的:在牛Ⅱ型胶原免疫诱导类风湿节炎大鼠的基础上，气管注入博来霉素，构建RA合并肺纤维化大鼠模型来观察JAK2抑制剂CEP33779对RA大鼠肺纤维化的改善程度及可能机制。方法:①体内研究：将SD大鼠随机分为正常组、单纯肺纤维化组、肺纤维化CEP治疗组、RA合并肺纤维化组、RA合并肺纤维化CEP治疗组。造模当天（d0）大鼠尾部皮下注射牛Ⅱ型胶原0.2 ml（1 mg/ml）构建RA模型；造模第13天（d13）气管内注射100 μl博来霉素（2.5 mg/kg）诱导肺纤维化模型；造模第14天（d14）治疗组予以CEP（10 ml/kg每日1次）灌胃，共4周。测定大鼠右后足关节肿胀度并行关节炎指数评分，检测肺顺应性（Cst）和肺比重，HE和Masson染色观察左肺病理变化，蛋白免疫印迹法（WB）检测右肺胞外基质水平。②体外研究：TGF-β1（10 ng/ml）刺激人胚肺成纤维细胞（HFL1）24 h和48 h后，用免疫荧光法检测p-JAK2表达；HFL1接种培养板后，设置空白组、TGF-β
1刺激组、TGF-β
1+LY2109761（TGFβ-R1/2抑制剂，0.5 mmol/L和2 mmol/L）组、TGF-β
1+CEP（0.1 mmol/L和1.0 mmol/L）组共育48 h，WB测定TGFβ-R2、α-SMA、JAK2、Col1表达水平。多组间比较采用Tukey′s检验，两组间比较采用独立
t检验。
结果:①体内研究：与正常组（1.45±0.04）相比，RA+PF+Vehicle组第13天大鼠关节肿胀度升高[（2.54±0.16），
t=16.02，
P<0.001]，CEP治疗3 d后第16天开始大鼠平均关节炎指数评分、足趾体积降低[（2.89±0.11），
t=5.78，
P<0.001；（1.92±0.13），
t=6.85，
P<0.001]。肺纤维化大鼠肺组织有不同程度的肿大，肺比重升高、Cst下降，肺炎症和纤维化程度升高[（0.96±0.06），
t=19.76，
P<0.001；（0.26±0.09），
t=17.64，
P<0.001；（3.63±1.51），
t=6.00，
P<0.001；（1.75±0.71），
t=5.84，
P<0.001]。CEP灌胃后，RA合并肺纤维化大鼠肺肿胀减轻，肺比重下降、Cst增加[（0.82±0.05），
t=5.76，
P<0.001；（0.43±0.18），
t=2.31，
P=0.038]，肺组织纤维化和炎症程度评分[（3.00±1.00），（1.56±0.52）]均有下降趋势，但差异无统计学意义。CEP可抑制肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β
1、TGFβ-R
2、α-SMA、Fn和JAK2的表达，5组间差异均有统计学意义（
F=9.02，
P=0.017；
F=4.86，
P=0.048；
F=6.57，
P=0.032；
F=11.26，
P=0.010；
F=13.32，
P=0.007）。②体外研究：TGF-β
1可刺激HFL1表达更强的磷酸化的JAK2（p-JAK2）荧光信号；WB可见TGFβ-R2、α-SMA、JAK2和Col1表达显著增加，LY、CEP干预后，上述蛋白呈浓度依赖性减少，5组间差异均有统计学意义（
F=337.30，
P<0.001；
F=20.61，
P<0.001；
F=100.60，
P<0.001；
F=180.90，
P<0.001）。
结论:JAK2抑制剂对RA相关肺纤维有改善作用，其机制可能是通过干扰JAK2与TGF-β
1信号通路的"串话"来减轻TGF-β
1所致的肺纤维化。

关键词：关节炎，类风湿、转化生长因子β、肺纤维化、JAK2、CEP33779

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在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：10-16,C1-1-C1-2