雷帕霉素通过调控海马组织富含半胱氨酸61和自噬对狼疮小鼠认知功能的保护作用研究

摘要：

目的:探讨雷帕霉素通过调控富含半胱氨酸61（Cyr61）和自噬对狼疮小鼠认知功能的作用机制。方法:将MRL/lpr狼疮小鼠随机分为狼疮组和雷帕霉素+狼疮组，野生型C57BL/6小鼠随机分为正常对照组和雷帕霉素组，每组6只，雷帕霉素+狼疮组和雷帕霉素组小鼠采用腹腔注射雷帕霉素（2.0 mg/kg）治疗；狼疮组和正常对照组注射等量二甲基亚砜（DMSO）。Morris水迷宫观察小鼠认知功能变化；蛋白质印迹法检测Cyr61和自噬蛋白程序性死亡受体-1（Beclin-1）、微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）表达；苏木素-伊红（HE）染色观察海马区病理改变；尼氏染色观察海马区神经元和尼氏小体改变；免疫荧光染色检测Cyr61及LC3B在海马区的定位及表达。多组间比较采用单因素方差分析。结果:蛋白质印迹法结果显示：与正常对照组[（0.73±0.08），（0.81±0.12），（0.80±0.03）]比较，狼疮组Cyr61（0.99±0.15）蛋白表达量明显升高（
P=0.011），Beclin-1（0.64±0.04）和LC3B（0.54±0.05）蛋白表达量明显降低（
P=0.025，
P=0.008）；雷帕霉素组和雷帕霉素+狼疮组Cyr61（0.75±0.05），（0.75±0.08）、Beclin-1（0.84±0.08），（0.92± 0.04）、LC3B（0.93±0.16），（0.76±0.08）蛋白表达均无明显改变（
P>0.05）。与雷帕霉素组比较，狼疮组Cyr61（0.99±0.15）蛋白表达量明显升高（
P=0.016），Beclin-1（0.64±0.04）和LC3B（0.54±0.05）蛋白表达量明显降低（
P=0.013，
P=0.001）；雷帕霉素+狼疮组Cyr61（0.75±0.08）、Beclin-1（0.92±0.04）、LC3B（0.76±0.08）蛋白表达均无明显改变（
P=0.999，
P=0.241，
P=0.062）。与狼疮组比较，雷帕霉素+狼疮组Cyr61（0.75±0.08）蛋白表达量明显降低（
P=0.016），Beclin-1（0.92±0.04）和LC3B（0.76±0.08）蛋白表达均明显升高（
P=0.002，
P=0.017）。免疫荧光结果显示：Cyr61和LC3B主要定位于海马神经元胞质中表达，定量检测结果与蛋白质印迹法检测结果趋势一致，差异均有统计学意义（
P=0.025，
P=0.032）。苏木精-伊红染色可见狼疮组小鼠海马区细胞层次和数量减少，排列稀疏，细胞核深染，呈核固缩、偏移等表现；尼氏染色可见尼氏小体相对减少，神经元排列松散，部分细胞出现空泡区，在雷帕霉素治疗后狼疮小鼠上述表现均有所改善。
结论:雷帕霉素对狼疮小鼠认知功能起保护作用，其机制可能是通过抑制海马组织Cyr61表达并促进自噬实现的。

关键词：西罗莫司、富含半胱氨酸蛋白质61、自噬、MRL/lpr狼疮小鼠、认知功能

所属期刊栏目：26

资助基金：广西自然科学基金重点项目2017GXNSFDA198005;右江民族医学院研究生创新计划项目YXCXJH2021001;Key project of Guangxi Natural Science Foundation2017GXNSFDA198005;Innovation Project of Youjiang Medical University for NationalitiesYXCXJH2021001

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：379-386,C6-1