Sonic Hedgehog通过调控促分裂原活化的蛋白激酶/胞外信号调节激酶信号通路促进类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖

摘要：

目的 初步探讨促分裂原活化的蛋白激酶/胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路在Sonic Hedgehog (Shh)调控RA成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)增殖中的作用.方法 收集病情活动(DAS28≥3.2)的RA患者经关节镜下滑膜清理术或关节置换术切除的滑膜组织,组织块培养法培养分离RA-FLS,分别予Shh激动剂purmorphamine、抑制剂cyclopamine及MAPK/ERK信号通路抑制剂U0126处理,采用蛋白质印迹法检测RA-FLS细胞MAPK/ERK信号通路关键蛋白phospho ERK1/2(p-ERK1/2)磷酸化水平,细胞增殖与毒性试剂盒(CCK8)检测细胞增殖活力,以及流式细胞术检测细胞增殖情况,采用单因素方差分析和Kruskal-Wallis H (K)方法对数据进行分析.结果 与对照组相比,浓度为1μmol/L的purmorphmine可短时间内引起p-ERK1/2蛋白表达增加,作用15 min时显著(P＜0.01),经U0126和cyclopamine处理后,p-ERK1/2蛋白表达明显下降(P＜0.01).RA-FLS经purmorphmine(1μmol/L)处理后,细胞增殖活力为(114±5)％,明显高于对照组(100±0)％(P＜0.01),purmorphmine(1μmol/L)组S期细胞占(8.39±0.60)％,较对照组(3.29±0.69)％明显增加(P＜0.01);经cyclopamine(10 μmol/L)处理后,细胞增殖活力为(89±1)％(P＜0.05),S期细胞占(1.53±0.22)％(P＜0.05);经purmorphamine(1μmol/L)和U0126(10 μmol/L)共同处理后,细胞增殖活力为(89±2)％(P＜0.05),S期细胞占(1.07±0.25)％(P＜0.05).结论 Shh可能通过调控MAPK/ERK信号通路,促进RA-FLS细胞增殖,促进滑膜增生,导致RA疾病的进展.

关键词：关节炎、类风湿、Sonic Hedgehog、丝裂原激活蛋白激酶激酶类、细胞增殖

所属期刊栏目：21

分类号：R96;R73

资助基金：National Natural Science Foundation of China81571584;Science and Technology planning Project of Guangdong Province of China 2013B021800076国家自然科学基金81571584;广东省科技计划项目2013B021800076

在线出版日期：2017-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：310-315,361