BTB-cap'n'collar同源异构体1-siRNA对转化生长因子-β1诱导的小鼠肺成纤维细胞中抗氧化因子表达的影响

摘要：

目的 观察BTB-cap’n'collar(CNC)同源异构体1(Bachl)-siRNA腺病毒载体对TGF-β1诱导后的小鼠肺成纤维细胞(MLF)中抗氧化因子及纤维化相关细胞因子表达的影响.方法 构建Bach1 siRNA腺病毒载体及空病毒载体,5 ng/ml TGF-β1处理MLF 24 h,分别感染空病毒载体及Bach1 siRNA腺病毒载体.RT-PCR及蛋白印迹法分别检测细胞中Bach1、血红素加氧酶1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化酶1 (GPx1)及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化还原酶1(NQO1)的mRNA和蛋白表达水平;ELISA检测细胞上清液中纤维化相关因子TGF-β1及IL-6的水平.多个组间的比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD检验.结果 TGF-β1诱导后MLF中Bach1 mRNA水平(2.127±0.089)和蛋白表达较空白对照组mRNA(1.000±0.067,t=-21.77,P＜0.01)及蛋白表达明显升高,细胞上清中纤维化相关因子TGF-β1 (52±6)及IL-6 (34±6)较空白对照组(26±4,t=-11.11,P＜0.01及20±5,t=-5.32,P＜0.01)的表达也明显升高;但抗氧化因子HO-1及GPx1的mRNA水平(0.403±0.040及0.567±0.112)和蛋白表达较对照组mRNA(1.000±0.181,t=25.57,P＜0.01及1.000±0.212,t=6.68,P＜0.05)和蛋白表达明显减低;Bach1 siRNA处理后,MLF中Bach1 mRNA水平(0.153±0.015)和蛋白表达较TGF-β1组及空载体组的mRNA水平(2.129±0.089及1.973±0.035,F=:1 835.95,P＜0.01)和蛋白表达明显降低;细胞上清中TGF-β1 (26±3)和IL-6(11±3)的表达水平也较TGF-β1组(52±6及34±6)及空载体组(49±5及33±6)明显降低(F=22.25,P＜0.01及F=28.38,P＜0.01),但HO-1(3.303 ±0.294)和GPx1(1.840±0.231) mRNA水平和蛋白表达较TGF-31组(0.403±0.040及0.567±0.112)及空载体组(0.353±0.057及0.667±0.090)明显升高(F=53.90,P＜0.01及F=526.25,P＜0.01).结论 沉默Bach1能够解除TGF-β1对MLF抗氧化作用的抑制效应及促纤维化效应,为CTD相关性间质性肺疾病(ILD)的氧化应激机制的研究及抗氧化治疗提供一定的实验依据.

关键词：Bach1、小鼠、肺、成纤维细胞、氧化性应激

所属期刊栏目：21

分类号：R73;S85

资助基金：国家自然科学基金81200513Natural Science Foundation of China 81200513

在线出版日期：2017-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：225-230