靶向肿瘤坏死因子-α慢病毒介导RNA干扰的实验性治疗研究

摘要：

目的：观察靶向小鼠TNF-α RNA干扰（RNAi）慢病毒载体颗粒对小鼠巨噬细胞株RAW264.7表达TNF-α、IL-1β及IL-6的影响，及对胶原诱导性关节炎（CIA）的治疗作用。方法分别用靶向小鼠TNF-α RNAi慢病毒颗粒、慢病毒阴性对照、空白对照感染小鼠巨噬细胞株 RAW264.7，检测TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达水平及TNF-α蛋白水平。制作小鼠CIA模型，设慢病毒RNAi治疗组、慢病毒阴性对照、空白对照和阳性对照，分别尾静脉注射 RNAi慢病毒颗粒、慢病毒阴性对照、PBS溶液，腹腔注射甲氨蝶呤，观测CIA关节炎积分，检测小鼠TNF-α血清水平，病理检查受累关节组织。结果①慢病毒治疗组TNF-αmRNA表达水平为0.291±0.021，低于慢病毒阴性对照0.925±0.013，差异有统计学意义（t=25.4，P<0.01），抑制率为68.5%；②慢病毒治疗组TNF-α血清水平为（249±11） ng/ml，低于阴性对照（382±6） ng/ml，差异有统计学意义（t=10.31，P<0.05），抑制率为34.7%。③慢病毒治疗组、阴性对照及空白对照之间，IL-1β、IL-6 mRNA表达水平差异无统计学意义（t=1.00，1.22，P均>0.05）。④尾静脉注射后第8天，慢病毒治疗组关节炎分值为2.50±0.19，低于空白对照3.63±0.18及阴性对照3.75±0.16，差异均具统计学意义（F=42.8，P<0.01），慢病毒治疗组与阳性对照的关节炎分值缓慢下降，至少持续至尾静脉注射后2周。⑤慢病毒治疗组、阳性对照TNF-α血清水平分别为（35±6） pg/ml、（32±7） pg/ml，均低于阴性对照47±3，差异有统计学意义（t=3.03，4.11，P均<0.01）。病理显示慢病毒治疗组关节炎症细胞浸润减轻。结论靶向小鼠TNF-αRNAi在体外、体内有效抑制TNF-αmRNA及蛋白表达，降低CIA关节炎分值，减轻炎症细胞浸润。慢病毒介导RNAi为RA治疗提供一可行、有效方法。

关键词：慢病毒、肿瘤坏死因子-α、RNA干扰、基因治疗、实验性

分类号：S85;R37

资助基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金2006BS03005

在线出版日期：2015-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：396-400