糖皮质激素及二膦酸盐对人骨组织及骨髓间充质干细胞Hedgehog通路的影响

摘要：

目的 探讨糖皮质激素及二膦酸盐类制剂对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)及骨组织Hedgehog通路的影响.方法 骨活检检测:40例系统性红斑狼疮(SLE)患者分成初诊组20例(未使用糖皮质激素),激素组20例(标准剂量糖皮质激素).其中激素组又按随机数字表法分成对照组10例(标准剂量糖皮质激素治疗即泼尼松首始剂量≥1 mg·kg-1·d-,治疗过程规律减量,如有复发,随病情需要加用糖皮质激素),治疗组10例(标准剂量糖皮质激素治疗+阿仑膦酸钠).24周后行骨髓穿刺术,检测Gli1平均积分吸光度.体外细胞培养检测:将鉴定成功的P2～P4代hBMSC,在普通培养下,分成重组人SHHN(rh-SHHN)细胞因子与高、中浓度甲泼尼龙(分别为10-3 mol/L,10-5 mol/L)单独或共培养组,用荧光定量核酸检测系统(qPCR)检测不同干预组细胞Gli1-mRNA水平的表达,茜素红染色法观察其矿化结节的程度.在成骨诱导培养下,分成低浓度二膦酸盐(10-9 mol/L)与高浓度甲泼尼龙单独或共培养组,用qPCR法检测2组细胞Gli1 mRNA的表达,茜素红染色法观察二膦酸盐对细胞矿化程度的影响.2组间比较采用t检验,多组间多因素的统计学分析采用析因方差分析.结果 第24周,服激素组骨组织Gli1蛋白平均积分吸光度(47±7)与初诊组(61±12)相比显著降低(t=4.442,P＜0.01)；单用标准剂量糖皮质激素患者骨组织Gli1蛋白平均积分吸光度(42±6)与二膦酸盐治疗组(51±6)相比显著下降(t=3.701,P=0.002).普通培养下:第7天,加入高、中浓度甲泼尼龙共刺激后hBMSCs Gli1 mRNA水平(0.38±0.04,0.68±0.24)与单用细胞因子组(2.01±0.38)相比显著降低(F=8.748,P＜0.01),细胞矿化结节程度明显降低；成骨诱导培养下,第14天,相比单用高浓度激素组(0.024±0.011),加入低浓度二膦酸盐后,hBMSCs Gli1 mRNA(0.034±0.006)表达显著升高(t=7.62,P＜0.01),细胞矿化结节程度明显增加.结论 高中浓度的糖皮质激素可以通过抑制Gli1的表达降低成骨作用,低浓度的二膦酸盐可以对抗糖皮质激素对Gli1表达及成骨的抑制作用.

关键词：糖皮质激素类、二膦酸盐类、骨和骨组织、间质干细胞

所属期刊栏目：17

分类号：R730.53;R593.241;R394.2

在线出版日期：2013-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：760-763,封3