高表达碳酸酐酶1参与骨化过程的研究

摘要：

目的 碳酸酐酶1不仅可以催化二氧化碳水化反应,还可以加速碳酸钙的形成,而钙沉淀是新骨形成的重要步骤.本研究以培养细胞为模型探索碳酸酐酶1在骨形成过程中的作用.方法 用成骨诱导培养基(OM)诱导骨肉瘤细胞Saos-2钙化,然后用茜素红染色法观察细胞矿化结节的形成,用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞骨化标志蛋白核心结合蛋白因子2(Runx2)、成骨细胞特异性转录因子(OSX)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素和骨涎蛋白(BSP)的表达.用蛋白印迹法和荧光定量PCR检测细胞钙化前后碳酸酐酶1的表达量的变化.用碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺处理Saos-2细胞,观察细胞钙化过程是否被抑制.2组间比较采用t检验,不同时间点的统计学分析采用重复测量的方差分析.结果 Saos-2 细胞在OM诱导后形成大量矿化结节(0.68±0.03与2.76±0.13,P＜0.01),Runx2、ALP、骨钙素、OSX和BSP 转录水平明显升高,显示OM可诱导Saos-2细胞钙化和骨化.Saos-2细胞钙化后碳酸酐酶1表达明显增高(0.25±0.03与0.94±0.06,P＜0.01).Saos-2细胞经乙酰唑胺处理后,碳酸酐酶1的表达量减少(1.09±0.05与0.55±0.07,P＜0.05),矿化结节形成明显减少(2.76±0.13与2.19±0.07,P＜0.01),骨化标志蛋白的表达也明显下降,说明抑制碳酸酐酶1表达可以抑制Saos-2细胞矿化和骨化过程.结论 碳酸酐酶1在新骨形成过程中起着重要作用.

关键词：碳酸酐酶1、骨生成、成骨诱导、生物矿化

所属期刊栏目：16

分类号：R73;R318;Q78

资助基金：国家自然科学基金;国家基础研究发展计划

在线出版日期：2013-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：804-808,后插2