10.3760/cma.j.issn.1007-7480.2009.04.008
基因芯片法研究干燥综合征患者外周血单个核细胞基因表达
目的 通过基因芯片技术分析血液系统受累干燥综合征(SS)患者及健康志愿者外周血单个核细胞的差异表达基因,为探讨疾病的发病机制、诊断及治疗提供新的依据.方法 选取3例以白细胞减低初次就诊的原发性干燥综合征(pSS)患者及同年龄健康志愿者为研究对象,Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),Trizol一步法提取mRNA,反转录至cDNA,分别用Cy5及Cy3荧光标记cDNA,与寡核苷酸片段进行杂交,采用GenePix Pro 3.0图像分析软件把图像信号转化为数字信号,计算Cy5和Cy3两种荧光信号比值.将有3个以上重复比值的基因输入SAM系统,分析差异有统计学意义的表达基因及通路.结果 伴白细胞减低的SS患者与健康志愿者PBMC差异有统计学意义的表达基因共82个,其中SS组上调基因45个,下调基因37个.这些差异表达基因以补体和凝血级联通路(C2,PROS1,F2R,SEPPING1)和细胞因子及受体(FASLG,MPL,CCL20,CXCL2)通路的差异有统计学意义(P<0.01).结论 血液系统受累SS患者在基因表达上除与其他脏器受累有共性的表达基因外,亦有特有的表达基因,这些基因和通路的筛选和进一步验证为疾病的发病机制及诊治提供了新的研究思路.
干燥综合征、寡核苷酸序列分析、外周血单个核细胞、白细胞减少
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R5(内科学)
2009-05-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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