人类白细胞抗原-B*2704/B*2705重链拮抗肽的筛选和初步鉴定

摘要：

目的 从噬菌体展示随机12肽库筛选人类白细胞抗原(HLA)-B·2704及B·2705重链拮抗肽并做初步鉴定.方法 用HLA-B*2704/B*2705重链胞外区蛋白分别筛选噬菌体展爪随机肽库,酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定阳性克隆,DNA测定确定氨基酸序列,免疫荧光和流式细胞术鉴 ,定噬菌体克隆分别与HLA-B*2704及B*2705细胞株结合的特异性.结果 经3轮筛选,获得12个HLA-B·2704拈抗肽,共有5种序列,分别为HTSFCSTHLCLI(×4),QHCSPTLCQIHR(×5),ARCTITL-CYLSN(×1),YGLCTDWYCHIT(×1),YPLCDAILCRLP(×1);10个B*2705拮抗肽共有4种序列,分别为:①SHCSPHWCALPF(×6);②HLCSNSLCLLPW(×2);③EPMCSWFWCTLP(×1);④WTCSPLLCTWGA(×1).比对分析表明,B*2704与B*2705拮抗肽的序列是基本一致的,均含有CS(T)TXXL(W)CXL表位.展示有B*2704拮抗肽的噬菌体克隆可与HLA-B*2704细胞株结合,阳性率为43.55%;而B*2705拈抗肽噬菌体克隆与HLA-B·2705细胞株的阳性结合率为45.69%.结论 筛选获得的HLA-B27拈抗肽的噬菌体克隆具有一定的亲和力,可与表达于细胞株表面的B*2704和B**2705分子特异性结合,而与正常B细胞不结合,因而表现出一定的结合特异性.

关键词：HLA-B27抗原、肽库、拮抗肽

所属期刊栏目：12

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2003CB515509;国家自然科学基金30470751

在线出版日期：2009-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：739-742,插2