柔肝中药对体外培养软骨细胞增殖能力及关节软骨低聚基质蛋白分泌的影响

摘要：

目的 探讨柔肝中药对体外培养软骨细胞增殖能力及关节软骨低聚基质蛋白(COMP)分泌的影响.方法 采用分阶段酶消化法体外培养兔软骨细胞,以2×104/ml密度接种3代内细胞,以Ⅱ型胶原的免疫组织化学研究鉴定细胞.给予家兔临床等效剂量灌胃后,抽取含药血清培养细胞,分别用5%、10%的柔肝方含药血清(分给药后1、3、5 h 3个时间点)以及正常兔血清、小牛血清干预7 d,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察中药含药血清对体外培养的软骨细胞增殖的影响;体外培养人软骨细胞,采用柔肝复方组及单味柔肝药提取物直接添加体外培养体系3 d,添加终浓度为10 mg/ml.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测药物对体外培养的人软骨细胞COMP分泌的影响.结果 培养细胞经Ⅱ型胶原的免疫组织化学染色后有阳性表现,在对软骨细胞增殖的影响方面,柔肝方含药血清各组均优于兔血清组和小牛血清组,其中含药血清组的3 h时间点总体优于1 h及5 h时间点(P＜0.05);在对软骨细胞上清COMP分泌方面,柔肝复方及单方提取物组均有促进细胞分泌COMP的作用(P＜0.05),但两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 柔肝方中药含药血清可以促进体外培养软骨细胞增殖;在药物直接干预的条件下,柔肝复方及单方提取物可以促进软骨细胞分泌COMP.

关键词：骨关节炎、细胞增殖、关节软骨低聚基质蛋白

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分类号：R2(中国医学)

资助基金：国家自然科学基金30300459;30472222;上海市自然科学基金04ZR14128;教育部新世纪优秀人才支持计划NCET-04-0438;上海市重点学科建设项目T0303;上海市教委"曙光计划"035SG1029;上海市科委资助项目03DZ19530;上海市青年科技启明星计划04QMX1434;上海市卫生局资助项目034065

在线出版日期：2007-09-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：469-472,插1