重组大鼠pAT153+IGF-1基因单独转染及其与pcDNA3+TGF-β1基因共同转染兔软骨细胞的实验研究

摘要：

目的通过对比重组大鼠胰岛素样生长因子l基因(pAT153+IGF-1)单独转染及其与重组大鼠转化生长因子β1基因(pcDNA3+TGF-β1)共转染兔软骨细胞后细胞增生及TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原含量的变化,探讨pAT153+IGF-1、pcDNA3+TGF-β1转染对兔软骨细胞分裂增生及分泌合成功能的影响,为将来可能的骨关节炎(OA)基因治疗提供理论基础.方法提取重组大鼠基因pAT153+IGF-1和pcDNA3+TGF-β1,将体外培养的兔膝关节软骨细胞分别用pAT153+IGF-1单转染、pAT153+IGF-1和pcDNA3+TGF-β1共转染,筛选阳性克隆后,对软骨细胞及其所分泌的TGF-β1、IGF-1、Ⅱ型胶原进行原位杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测、流式细胞仪检测、3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)检测.结果基因转染组与空白组相比,TGF-β1、IGF-1、Ⅱ型胶原的含量均明显提高,DNA合成记数及细胞周期S期的比例也明显高于空白组(P＜0.05);基因共转染组的上述指标较pAT153+IGF-1单转染组高,差异有显著性(P＜0.05).结论基因pAT153+IGF-1、pcDNA3+TGF-β1转染软骨细胞后,TGF-β1、IGF-1及Ⅱ型胶原含量显著增高,细胞增生及细胞数量明显增多,上述基因转染有助于软骨细胞活力的提高;pAT153+IGF-1和pcDNA3+TGF-β1双基因共转染兔软骨细胞后对软骨细胞分裂增生及分泌合成的促进优于pAT153+IGF-1单基因转染.

关键词：软骨细胞、基因、转染

所属期刊栏目：8

分类号：R593(全身性疾病)

资助基金：国家自然科学基金30371440

在线出版日期：2004-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：649-653