GANT61对子宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响及其机制的探讨

摘要：

目的 观察神经胶质瘤相关癌基因同源物1(Gli-1)特异性拮抗剂——GANT61在体内和体外对子宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制.方法(1)实验分为两组,实验组加入GANT61,对照组仅加入二甲基亚砜(DMSO),采用逆转录(RT)-PCR技术和蛋白印迹(western blot)法分别检测两组HeLa细胞中Gli-1 mRNA和蛋白的表达,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL法)检测两组HeLa细胞的凋亡率.(2)建立子宫颈癌裸鼠移植瘤模型(随机分为实验组和对照组,分别于裸鼠背部皮下注射GANT61和DMSO处理后的HeLa细胞), 28 d后剥除两组裸鼠的移植瘤,HE染色观察两组移植瘤组织的形态,免疫组化SP法检测两组移植瘤组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3和生存素(survivin)蛋白的表达.结果(1)实验组HeLa细胞中Gli-1 mRNA和蛋白的表达水平分别为0.81±0.47、0.15±0.07,均明显低于对照组的2.37±1.61、0.44±0.07(P<0.05).实验组HeLa细胞的凋亡率为(27.1±11.4)%,明显高于对照组的(6.9±3.1)%(P=0.002).(2)接种28 d后,实验组裸鼠移植瘤体积为(217±78)mm3,明显低于对照组的(677±177)mm3 (P=0.000);实验组裸鼠移植瘤重量为(0.39±0.17)g,明显低于对照组的(1.26±0.36)g(P=0.003).光镜下观察,实验组裸鼠移植瘤组织中的细胞凋亡情况较对照组明显;实验组裸鼠移植瘤组织中caspase-3、survivin蛋白的积分吸光度(IA)值分别为29 335±1 512、11 530±1 012,对照组分别为12 382±1 079、31 032±1 292,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 GANT61可在体外抑制HeLa细胞中Gli1 mRNA和蛋白的表达,并在体内、体外促进HeLa细胞的凋亡,其促凋亡机制可能与上调凋亡相关分子caspase-3的表达并下调survivin的表达有关.

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在线出版日期：2019-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：188-191