脂联素对体外高糖诱导的滋养细胞增殖的抑制作用

摘要：

目的：通过体外实验了解脂联素对高糖诱导的滋养细胞增殖的作用。方法稳定培养传代滋养细胞BeWo细胞系，采用高糖（25 mmol/L葡萄糖）处理后，蛋白印迹（western blot）法检测细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的表达，细胞计数试剂盒8（CCK-8）法对细胞增殖情况进行分析，并采用western blot检测高糖培养条件下BeWo细胞中脂联素的表达；再加用体外重组的脂联素（20μg/ml）处理BeWo细胞，分别用3种方法对细胞增殖情况进行分析：CCK-8法、流式细胞仪（检测细胞周期）、增殖细胞核抗原（PCNA）免疫细胞化学方法。以高浓度甘露醇、正常浓度（10 mmol/L）葡萄糖培养的细胞为对照。结果与正常浓度葡萄糖以及高浓度甘露醇处理的BeWo细胞相比，随着时间延长（1~5 d），高糖显著增加了BeWo细胞的增殖（P<0.05），培养5 d时细胞吸光度（A）值分别为0.710±0.030、0.670±0.040、0.910±0.020，3者比较，差异有统计学意义（P<0.05）。western blot结果显示，与高浓度甘露醇处理的BeWo细胞相比，高糖处理的BeWo细胞中脂联素表达下降。添加脂联素处理后，脂联素+高糖处理的BeWo细胞（A值为0.770±0.050）与单纯高糖处理（A值为0.990±0.070）相比，细胞增殖受到明显抑制（P<0.05）；脂联素+高糖处理的BeWo细胞与单纯高糖处理的细胞相比，处于G2+S期的细胞比例显著下降[分别为（40.7±2.1）%、（44.9±3.9）%]，差异有统计学意义（P<0.05）；脂联素+高糖处理的BeWo细胞与单纯高糖处理的细胞相比，PCNA阳性细胞数明显减少，PCNA阳性细胞率分别为（28±5）%、（44±5）%，两者比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论脂联素能抑制高糖诱导的滋养细胞增殖作用。

关键词：糖尿病、妊娠、脂联素、滋养层、细胞增殖

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分类号：R96;R69

资助基金：广东省科技计划2012B031800285；广东省自然科学基金2015A030313198@@@@ Science and Technology Planning of Guangdong Province2012B031800285;Natural Science Foundation of Guangdong Province2015A030313198

在线出版日期：2016-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：204-208