10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2013.03.009
槲皮素对子宫颈癌细胞中乙酰肝素酶表达的影响
目的 探讨槲皮素对宫颈癌细胞中乙酰肝素酶(HPA)表达的影响.方法 免疫荧光法检测宫颈癌细胞系HeLa、Caski细胞中HPA蛋白的表达.实验分为3组,槲皮素组:在HeLa、Caski细胞中加入含不同浓度(20、40、80 μmol/L)槲皮素的RPMI 1640培养基;阳性对照组:小分子RNA(siRNA)转染HeLa、Caski细胞沉默其HPA的表达后,加入RPMI 1640培养基;空白对照组:在HeLa、Caski细胞中仅加入RPMI 1640培养基.3组HeLa、Caski细胞分别培养24、48、72 h后,采用实时定量PCR技术和蛋白印迹法检测其HPA mRNA和蛋白的表达.结果 (1)免疫荧光法检测显示,HeLa和Caski细胞中均有HPA蛋白的表达,均位于细胞核与细胞质中,呈红色荧光.(2)实时定量PCR技术检测显示,槲皮素组HeLa、Caski细胞中HPA mRNA的表达水平均随槲皮素浓度(分别为20、40、80 μmol/L)的升高、处理时间(分别为24、48、72 h)的延长而明显下降(P<0.01),呈浓度和时间依赖性.与空白对照组相比,槲皮素组中40、80 μmol/L槲皮素处理后HeLa、Caski细胞中HPA mRNA表达水平均明显下降(P<0.05);与阳性对照组相比,槲皮素组中80 μmol/L槲皮素处理后HeLa细胞中HPA mRNA表达水平无明显变化(P>0.05),而Caski细胞中HPA mRNA表达水平明显升高(P<0.01).(3)蛋白印迹法检测显示,槲皮素组HeLa、Caski细胞中HPA蛋白的相对表达水平均随槲皮素浓度(分别为20、40、80 μmol/L)的升高、处理时间(分别为24、48、72 h)的延长而明显下降(P<0.01),呈浓度和时间依赖性.与空白对照组相比,槲皮素组中40、80 μmol/L槲皮素处理后HeLa、Caski细胞中HPA蛋白表达水平明显下降(P<0.05);与阳性对照组相比,槲皮素组中80 μmol/L槲皮素处理后HeLa、Caski细胞HPA蛋白表达水平无明显变化(P>0.05).结论 槲皮素对宫颈癌细胞中HPA mRNA和蛋白的表达均有明显抑制作用,且这种抑制作用与槲皮素浓度与处理时间均呈明显依赖关系.
槲皮素、葡糖醛酸糖苷酶、宫颈肿瘤、HeLa细胞、细胞系、肿瘤
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R737.33;R3;R285.5
国家自然科学基金31170329
2013-06-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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