10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2012.02.012
PI3K/Akt/NF-κB信号通路在FSH促进卵巢癌细胞增殖与侵袭中的作用
目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶( PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核因子κB(NF-κB)信号通路在卵泡刺激素(FSH)促进卵巢癌细胞增殖和侵袭中的作用.方法 培养卵巢癌细胞株SKOV3、3AO细胞,取对数生长期细胞用于以下实验,实验分为4组,即对照组、FSH组、LY294002(PI3K抑制剂)组、FSH+ LY294002组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(分别为10、20、40、80、160 U/L) FSH处理不同时间(分别为12、24、48、72h)后SKOV3、3AO细胞的增殖情况,倒置显微镜观察各组SKOV3、3AO细胞的形态,体外侵袭实验检测各组SKOV3、3AO细胞的侵袭能力,蛋白印迹法检测各组SKOV3、3AO细胞中FSH受体(FSHT)、Akt1/2、磷酸化Akt (p-Akt)、NF-κB p65蛋白的表达.结果 (1)SKOV3、3AO细胞增殖率的比较:SKOV3、3AO细胞经不同浓度FSH处理不同时间后,其增殖率明显高于相应对照细胞(P<0.05).40U/L的FSH处理SKOV3细胞48 h、3AO细胞24h时,其细胞增殖率最高,分别为(166.9±1.1)%、(173.9±1.6)%.(2)各组细胞的形态:对照组SKOV3细胞为短梭形、3AO细胞为长梭形,胞核均呈圆形或椭圆形,胞质透亮;FSH组细胞变长或呈多角形,胞核较前稍增大,细胞密度较对照组增大;LY294002组细胞体积变小,胞质浓缩,部分细胞变圆漂浮;FSH+ LY294002组细胞形态较对照组无明显改变,细胞密度小于FSH组.(3)各组细胞的侵袭能力:对照组、FSH组、LY294002组及FSH+ LY294002组SKOV3细胞的穿膜细胞数分别为(26±6)、(118±19)、(18±5)、(38±7)个;3AO细胞分别为(19±4)、(134±20)、(12±3)、(58±11)个.FSH组两种细胞的穿膜细胞数均明显多于对照组(P<0.05),LY294002组及FSH+ LY294002组两种细胞的穿膜细胞数均明显少于FSH组(P<0.05).(4)各组细胞中相应蛋白的表达:FSH组、LY294002组、FSH+ LY294002组SKOV3、3AO细胞FSHR、Akt1/2蛋白的表达水平分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).FSH组SKOV3、3AO细胞p-Akt蛋白的表达水平及胞核与胞质中NF-κB p65蛋白表达的比值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);LY294002组、FSH+LY294002组SKOV3、3AO细胞p-Akt蛋白的表达水平及胞核与胞质中NF-κB p65蛋白表达的比值低于FSH组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 FSH可能是通过PI3K/Akt信号通路调节卵巢癌SKOV3、3AO细胞中NF-κB的活性,实现对卵巢癌细胞的促增殖和侵袭作用.
卵巢肿瘤、细胞增殖、卵泡刺激素、NF-κB、1-磷脂酰肌醇3-激酶、原癌基因蛋白质c-akt
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R71(妇产科学)
2012-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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