卵巢上皮性癌6B11抗独特型微抗体疫苗免疫方案的探讨

摘要：

目的探讨卵巢上皮性癌6B11抗独特型微抗体(6B11微抗体)的最佳免疫剂量和免疫间隔时间,为用于临床治疗卵巢上皮性癌打下基础.方法 (1)采用基因工程方法构建6B11微抗体的重组表达载体,并将其转化到大肠杆菌BL21中进行表达.直接酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定其免疫学活性.(2)将BALB/c小鼠随机分为A、B、C、D、E、F组,于第1、14、28天时均分别给予6B11微抗体150、100、50 μg及小鼠IgG 100 μg、人IgG 100 μg、磷酸盐缓冲液100 μl,其中A、B、C组为实验组,D、E、F组为对照组.间接ELISA法测定各组小鼠血清中抗卵巢上皮性癌6B11抗独特型抗体(6B11抗体)的抗体(即Ab3)的水平,并观察其变化规律.(3)将小鼠脾淋巴细胞作为效应细胞,人卵巢上皮性癌细胞株SKOV3细胞作为靶细胞,设定效靶比为250∶ 1、125∶ 1、60∶ 1、30∶ 1,51Cr释放实验检测各组小鼠脾淋巴细胞产生的抗体依赖的细胞毒效应(ADCC);设定血清稀释度为1∶ 2、1∶ 25、1∶ 50,51Cr释放实验检测各组小鼠脾淋巴细胞产生的补体依赖的细胞毒效应(CDC).分别于紫外光波长490 nm时测定其吸光度(A)值.结果 (1)大肠杆菌BL21中成功表达6B11微抗体,并证实其保留了6B11抗体的免疫学活性.(2)用上述不同剂量6B11微抗体免疫BALB/c小鼠,在第14天注射后1周,血清中可检测到较低水平Ab3;第28天注射后1周,Ab3水平达到最高值,A、B、C组平均A值分别为1.16、1.11、1.06;此Ab3水平持续6周,6周内A、B、C组平均A值分别为1.05、1.06、0.94,B组略高于A、C两组,但3组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);第7周Ab3水平明显下降.此时,给予加强免疫,1周后Ab3水平很快升高,并持续至少2周.(3)在4个不同的效靶比条件下,实验组小鼠脾淋巴细胞诱导产生的ADCC明显高于对照组(P<0.05);效靶比为1∶ 125时,A、B、C组51Cr自然释放率分别为23%、17%、12%,3组间比较,差异有统计学意义(P<0.05).血清稀释度1∶ 50时,A、B、C组51Cr自然释放率分别为47%、39%、26%,A、B组BALB/c小鼠血清诱导产生的CDC明显高于C组(P<0.05),而A和B组相比,差异则无统计学意义(P>0.05).结论6B11微抗体可作为卵巢上皮性癌疫苗,其较佳的动物免疫方案为:免疫剂量为100 μg;基础免疫分别于第1、14、28天进行,共 3次;间隔6周给予加强免疫.

关键词：卵巢肿瘤、抗体、抗独特型、免疫接种、加强、剂量效应关系、免疫、小鼠

所属期刊栏目：41

分类号：R73(肿瘤学)

在线出版日期：2006-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：52-56