庆大霉素对小鼠耳蜗螺旋神经节细胞损伤机制初步研究

摘要：

目的 探讨庆大霉素对小鼠耳蜗螺旋神经节细胞(spiral ganglion cell,SGC)的损伤机制.方法 取出生后2～6天昆明种乳小鼠耳蜗,利用酶消化和机械分离相结合的方法分离出SGC,并进行体外培养.将培养4天的SGC用4%多聚甲醛室温固定30min,以小鼠源神经纤维细丝蛋白(Neurofilament-68/200 kDa,NF-L+H)单克隆抗体作为一抗,按照SP法(streptavidin-perosidase法,链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法)对所培养细胞进行免疫细胞化学染色,对SGC作出鉴定.将培养第4天的细胞分为4组:空白对照组及3种浓度的庆大霉素干预组(庆大霉素终浓度分别为50mg/L、100mg/L、150mg/L),作用48 h后收集各组细胞进行透射电镜分析.结果 SGC原代培养获得成功,经NF-L+H抗体免疫细胞化学染色,其胞质及突起均呈阳性反应,染成棕黄色,一般有相对生长的两个突起,为典型的双极神经元.在透射电镜下观察SGC超微结构,3种浓度的庆大霉素组SGC与空白对照组相比.均出现明显的形态学改变,这种改变与凋亡相关.结论 庆大霉素对小鼠耳蜗SGC有直接毒性作用,可导致细胞凋亡,线粒体损伤在这一过程中可能具有重要意义.

关键词：庆大霉素类、螺旋神经节、细胞、培养的、显微镜检查、电子、透射、细胞凋亡

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分类号：R764.4;R361.3(耳鼻咽喉科学)

资助基金：福建医科大学学科带头人基金资助项目jxk200721

在线出版日期：2010-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：256-260