JNK/AP-1通路在柚皮素抑制RSV感染引起气道黏液高分泌中的作用

摘要：

目的 探讨JNK/AP-1通路在柚皮素抑制呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起气道黏液高分泌中的作用.方法 通过RSV A2株感染人肺腺癌上皮(A549)细胞,细胞维持液培养为细胞对照组,细胞中加入不同MOI的RSV吸附2h为RSV感染组(R1、R2、R3组MOI分别为0.5、1.0、5.0),在RSV感染前加入柚皮素(Nar)预处理1h为Nar干预组(N1组为Nar 30 μmol/L+ RSV、N2组为Nar100 μmol/L+ RSV),不同浓度的Nar培养液培养为Nar组(N3、N4组的Nar分别为30 μmol/L和100 μmol/L),含0.1％的二甲基亚砜的细胞培养液培养细胞为DMSO组(D组),用10.μmol/L的JNK通路阻断剂SP600125预处理1h后加用MOI=1.0的RSV感染2h,感染后加入细胞维持液为SP600125干预组(S组).采用实时荧光定量PCR、ELISA检测各组细胞黏蛋白(MUC)5AC的表达情况;采用Western blot检测JNK、P-JNK、AP-1蛋白的表达水平.结果 RSV感染组MUC5AC mRNA及蛋白表达水平均高于细胞对照组(P＜0.05),且随病毒感染量的增加,MUC5AC基因及蛋白表达量也逐渐增加.Nar干预组与RSV感染组相比,MUC5AC mRNA和蛋白水平降低,随Nar浓度增加,降低更为明显,呈剂量相关性(P＜0.05).R2组p-JNK、AP-1蛋白相对表达量分别为3.31 ±0.34、1.94±0.05,显著高于细胞对照组(均为1.00 ±0.00)(P＜0.05).N2组、S组p-JNK蛋白相对表达量为2.10±0.27、1.97 ±0.16,AP-1蛋白表达量为1.40±0.03、1.36±0.05,均较R2组下降(P＜0.05).N2组和S组MUC5AC蛋白表达量为(43.17±1.06)μg/L、(44.02±0.99) μg,/L,差异无统计学意义(P＞0.05),但两组均低于R2组(48.19 ±0.47)μg/L(P＜0.05).结论 RSV A2株感染A549细胞会导致黏蛋白MUC5AC基因转录和蛋白表达增加,JNK/AP-1通路在柚皮素抑制RSV感染引起的气道黏液高分泌中起调控作用.

关键词：呼吸道合胞病毒、黏液、黏蛋白5AC、柚皮素

所属期刊栏目：53

分类号：R780.2;R285.5;R563.9

资助基金：国家临床重点专科建设项目20130217

在线出版日期：2015-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：182-186