儿童急性呼吸道感染中腺病毒环介导等温扩增技术检测方法的建立

摘要：

目的 利用环介导等温扩增技术(LAMP),建立一种快速可靠的儿童急性呼吸道感染标本中腺病毒检测方法.方法 根据腺病毒六邻体基因序列设计特异性LAMP引物,使用实时浊度仪对所建立的LAMP方法进行特异性与灵敏度评估后,对3、7、14型腺病毒分离株共11株进行了检测,随后对经直接免疫荧光法(DFA)鉴定为腺病毒阳性的呼吸道标本36例、腺病毒阴性的呼吸道标本72例分别应用巢式多重PCR和LAMP两种方法进行检测.结果 所建立的LAMP方法最低检出腺病毒DNA浓度为1.9×102拷贝/ml；方法特异性好,与其他病毒间无交叉反应；11株腺病毒分离株应用LAMP方法检测全部为阳性；36例已经过DFA鉴定为腺病毒阳性的标本中,应用LAMP法共检出腺病毒DNA阳性34例；72例DFA鉴定为腺病毒阴性的标本应用LAMP方法检测5例阳性.本研究建立的LAMP方法与DFA的总符合率为93.5％；与巢式多重PCR的总符合率为98.1％.结论 本研究建立的LAMP方法耗时短、灵敏度好、特异性高、操作简便,适用于儿童呼吸道标本中腺病毒的实验室快速检测,具有较好的实际应用前景.

关键词：腺病毒、人、呼吸道感染、儿童、环介导等温扩增技术

所属期刊栏目：51

分类号：S852.65;R725.1;R446.5

资助基金：国家自然科学基金;北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养计划工程

在线出版日期：2013-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：52-57