整合素β3受体信号途径在结缔组织生长因子调控肺动脉平滑肌细胞增殖与迁移和细胞外基质基因表达中的作用

摘要：

目的 探讨整合素β3受体信号途径在结缔组织生长因子(CTGF)促进肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和细胞外基质基因表达中的作用机制研究.方法 分离并培养SD大鼠肺动脉中膜平滑肌细胞,实验使用第3～7代细胞；细胞分为3组:(1)空白组:不加任何刺激因子；(2)CTGF组:培养体系中加入CTGF(50 ng/ml)；(3)CTGF+整合素β3抗体组:培养体系中加入CTGF(50ng/ml)及整合素β3抗体(10 mg/L).以上3组细胞中加入CTGF (50 ng/ml)和浓度分别为0、5、10、15、20mg/L的整合素β3抗体,共同孵育24、48、72及96 h,采用WST-1细胞增殖试剂检测细胞增殖的变化；应用Transwell方法在相差显微镜下观察细胞迁移数目的变化；应用荧光定量RT-PCR检测Ⅰ型胶原α1、Ⅲ型胶原α1和纤维连接蛋白1 mRNA表达；应用Western blot和免疫组化检测纤维连接蛋白表达.结果 整合素β3抗体对CTGF促肺动脉平滑肌细胞增殖有明显抑制作用(P＜0.05),其中整合素β3抗体浓度为10 mg/L时抑制率最高.CTGF组肺动脉平滑肌细胞迁移数目(25.00±1.57)个,较空白组(11.00±2.08)个多(P＜0.01)；CTGF+整合素β3抗体组肺动脉平滑肌细胞迁移数目( 17.00±4.16)个,较CTGF组少(P＜0.05)；与对照组比较,CTGF组肺动脉平滑肌细胞Ⅰ型胶原α1(4.28±0.33)、Ⅲ型胶原α1(4.41±0.35)和纤维连接蛋白1(4.05±0.33) mRNA表达增加(P＜0.01),呈时间依赖性；与CTGF组比较,CTGF+整合素β3抗体组Ⅰ型胶原α1 (3.38 ±0.30)、Ⅲ型胶原α1(3.40±0.30)和纤维连接蛋白1(3.12±0.29)mRNA表达减少(P＜0.05),但较对照组表达增加(P＜0.05)；与对照组比较,CTGF组能明显增加肺动脉平滑肌细胞纤维连接蛋白表达(P＜0.01),整合素β3抗体能抑制CTGF诱导的纤维连接蛋白表达(P＜0.01),但纤维连接蛋白表达较对照组仍有增加(P＜0.01).结论 整合素β3信号途径能介导CTGF诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和细胞外基质基因的表达,CTGF-整合素β3信号途径可能在肺血管重构中起重要作用.

关键词：整合素β3、结缔组织生长因子、细胞外基质、高血压、肺性、细胞增殖、细胞迁移

所属期刊栏目：49

分类号：R72(儿科学)

资助基金：四川省卫生厅项目100264

在线出版日期：2012-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：895-900