免疫毒素2E8去甲斑蝥素的研制及其体外靶向抑制效应研究

摘要：

目的 采用本院自行研制的ZCH-4-2E8细胞分泌的抗人CD19单克隆抗体与去甲斑蝥素(NCTD)进行连接制备免疫毒素,研究其在体外的靶向杀伤作用.方法 通过凝胶过滤层析法纯化2E8单抗,SDS-PAGE电泳鉴定抗体的纯度;活泼酯法制备免疫毒素2E8-NCTD;流式细胞仪测定免疫毒素的抗体活性及Nalm-6细胞和K562细胞上CD19抗原表达情况;台盼蓝计数法比较2E8抗体、NCTD、2E8-NCTD免疫毒素对Nalm-6细胞和K562细胞的杀伤作用.结果 纯化后的2E8单抗经SDS-PAGE鉴定纯度达99.00%以上;2E8培养上清在Nalm-6细胞上的阳性率为99.34%,而在K562细胞上则为0.98%,2E8-NCTD免疫毒素与Nalm-6细胞的阳性反应率为99.90%;培养96 h时,与对照组相比,2E8-NCTD(10 μg/ml)对CD19+的Nalm-6细胞的生长影响有统计学意义(96 h抑制率71.25%,P＜0.001),而纯化的2E8抗体(10 μg/ml)对Nalm-6细胞生长则无明显抑制作用(96 h抑制率为30.29%,P＞0.05);10μg/ml 2E8抗体、10μh/ml 2E8-NCTD对CD19-的K562细胞(96 h抑制率分别为4.17%和15.41%)则无明显抑制作用(P＞0.05).结论 成功制备2E8-NCTD免疫毒素,该免疫毒素在体外具有明显的靶向杀伤白血病细胞Nalm-6的作用.

关键词：抗体、单克隆、抗原、CD19、免疫毒素类、去甲斑蝥素

所属期刊栏目：46

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30170391;浙江省自然科学基金Z205166;301570

在线出版日期：2008-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：493-497