应用DHPLC技术检测非缺失型DMD致病基因的新突变

摘要：

目的 建立检测Duchenne型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)致病基因dystrophin突变的快速、敏感的微小突变筛查系统.方法 选择经多重PCR检测未发现dystrophin基因大尺度缺失的DMD患儿20例,年龄在2～10岁,以其基因组DNA为模板,通过PCR反应,分别扩增dystrophin基因外显子及侧翼序列,采用变性高效液相色谱(DHPLC)技术进行突变筛查,对DHPLC峰形变异的外显子片段行PCR产物直接测序,确定突变的具体位点和类型.结果 筛查了包括2个缺失热点区dystrophin基因的68个外显子和3'UTR部分片段,分别在4例患儿中检测出该基因的4种致病突变:c.6808_6811delTTAA,c.4959_4960insA,c.8656C＞T和c.8608C＞T.前两例引起移码突变分别导致p.Leu2270MetfsX9和p.Ser1654LysfsX5,后两例为无义突变分别导致p.R2886X和p.R2870X.其中c.6808_6811delTTAA,c.4959_4960insA和c.8656C＞T为文献未曾报道的新突变.结论 DHPLC可以作为有效地筛查DMD微小突变的检测方法.

关键词：肌营养不良、杜氏、色谱法、高效液相、突变

所属期刊栏目：45

分类号：R72(儿科学)

资助基金：国家科技攻关项目2004BA720A04

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：413-416