应用实时聚合酶链反应技术检测儿童呼吸道标本中的呼吸道合胞病毒

摘要：

目的建立实时聚合酶链式反应(PCR)技术检测儿科呼吸道标本中呼吸道合胞病毒(RSV)的方法.方法(1)根据RSV N基因序列设计合成分别用于扩增RSV A亚型和B亚型的TaqMan探针和引物,建立实时PCR方法,进行灵敏度和特异性检测.(2)采用实时PCR检测61例RSV检测阳性的冻存标本和103例新收集的呼吸道标本,并与病毒分离、间接免疫荧光、巢式PCR结果相比较.结果(1)实时PCR对A亚型RSV检测的灵敏度为5.25 pfu,B亚型为3.75 pfu,与巢式PCR相同.(2)实时PCR检测其他呼吸道病毒阳性标本,结果均为阴性;A亚型和B亚型之间无交叉.(3)实时PCR检测其他方法检测过的RSV阳性的冻存标本61例,A亚型(30例)阳性为27例(90%),B亚型(31)阳性为27例(87.1%).(4)103例新鲜标本中,实时PCR检出RSV 35例(A亚型7,B亚型28),阳性率34.0%,其中巢式PCR阳性31例,阳性率30.1%;间接免疫荧光阳性22例,阳性率21.4%;病毒分离阳性9例,阳性率8.7%.实时PCR阴性的68例,其他方法均为阴性.实时PCR与三种方法的一致性检验,一致率在74.76%～96.12%(P均＜0.01);差异性检验结果说明,实时PCR阳性检出高于间接免疫荧光和病毒分离(P均＜0.01),而与巢式PCR差异无统计学意义(P＞0.05).结论实时PCR检测儿科鼻咽分泌物标本中RSV的方法,敏感性、特异性和可重复性好,可用于急性呼吸道感染患儿标本中的RSV检测.

关键词：呼吸道合胞病毒、聚合酶链反应

所属期刊栏目：44

分类号：R72(儿科学)

资助基金：北京市人类疾病基因诊断实验室基金JS96004

在线出版日期：2006-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：450-454