新生大鼠脑缺氧缺血后细胞色素C释放与凋亡的关系

摘要：

目的探讨未成熟脑在缺氧缺血 (HI) 后细胞色素C释放的时相变化及细胞色素C释放与半胱天冬酶的激活和DNA损伤的关系.方法 7日龄Wistar新生大鼠在缺氧缺血后不同时间点处死取脑,部分脑组织进行手工匀浆分离胞浆和线粒体成分进行Western蛋白印迹检查,部分进行组织切片用于细胞色素C免疫组化染色和免疫荧光双染色.结果 Western蛋白印迹显示线粒体中细胞色素C在HI后1 h未见明显变化,HI后14 h HI侧较对侧(H)减少46%;而HI侧脑组织胞浆中细胞色素C的含量在HI后1 h已明显增加, 在HI后14 h增加更明显.免疫组化结果显示大脑皮层细胞色素C阳性细胞数在HI后1 h为8.4±1.8 个/高倍视野,明显高于正常对照的1.5±0.8个/高倍视野(P<0.01),并随HI后恢复时间的延长阳性细胞逐渐增加,在HI后14 h达到峰值(29.0±5.2 个/高倍视野);而TUNEL阳性细胞数在HI后1 h为14±3个/高倍视野, 明显高于正常对照的1.5±0.8个/高倍视野(P<0.01), 在HI后24 h达到峰值(286±86个/高倍视野). 荧光染色发现细胞色素C释放与活性半胱天冬酶-3仅在HI后早期同时染色, 并且阳性细胞表现为核浓缩,随HI后恢复时间的延长,细胞色素C的阳性细胞明显少于活性半胱天冬酶-3的阳性细胞; 细胞色素C与TUNEL双染色显示仅细胞色素C弱阳性的细胞表现为TUNEL强阳性和核浓缩.结论缺氧缺血后细胞色素C的释放是凋亡的早期改变之一.

关键词：细胞色素c、缺氧缺血、脑、线粒体、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶、细胞凋亡

所属期刊栏目：42

分类号：R72(儿科学)

资助基金：河南省科技攻关项目0122032100

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：437-440