10.3760/cma.j.cn115330-20230608-00720
siRNA沉默STAT6抑制嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎产生的实验性研究
目的:探讨用小干扰RNA（siRNA）沉默信号传导和转录激活因子6（signal transducer and activator of transcription 6，STAT6），能否抑制小鼠嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎（eosinophilic chronic rhinosinusitis，ECRS）的产生。方法:2022年3—9月期间，48只BALB/c雌性小鼠随机分为Control（对照）组、Vehicle（转染试剂）组、Scramble siRNA（对照siRNA）组和STAT6 siRNA组，每组12只。用卵清蛋白（OVA）联合金黄色葡萄球菌肠毒素B（staphylococcal enterotoxin B，SEB）诱导小鼠ECRS，并用siRNA鼻腔滴注进行干预。随后收集外周血以及鼻黏膜组织标本。血细胞分析仪检测外周血嗜酸粒细胞（Eos）的数目及百分比；酶联免疫吸附实验检测外周血总免疫球蛋白E（IgE）和OVA-特异性IgE（OVA-sIgE）水平，以及鼻黏膜组织中干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-5、IL-17A和嗜酸粒细胞趋化因子1（Eotaxin-1）的表达量；用苏木精-伊红（HE）染色鼻黏膜组织切片，在高倍视野（HPF）下对Eos进行计数；蛋白免疫印迹检测鼻黏膜中STAT6和磷酸化STAT6（p-STAT6）蛋白水平；免疫荧光染色对鼻黏膜中p-STAT6表达进行定位。采用SPSS 18.0软件进行统计学分析。结果:STAT6 siRNA组小鼠外周血Eos计数、Eos百分比、总IgE以及OVA-sIgE水平［（0.318±0.045）×10
3/μl、（3.667±0.479）%、（102.070±13.205）ng/ml和（38.870±7.352）ng/ml］明显低于Vehicle组［（0.532±0.049）×10
3/μl、（6.710±1.061）%、（203.102±29.653）ng/ml和（74.575±6.432）ng/ml，
Z值分别为-2.56、-2.24、-2.40、-2.56，
P值均<0.05］和Scramble siRNA组［（0.493±0.036）×10
3/μl、（5.858±0.872）%、（189.964±30.042）ng/ml和（80.935±8.358）ng/ml，
Z值分别为-2.17、-2.08、-2.24、-2.72，
P值均<0.05］，且鼻黏膜组织中IL-5和Eotaxin-1表达量分别为（312.279±34.281）pg/ml和（25.297±4.323）pg/ml，也显著低于Vehicle组［（689.667±31.905）pg/ml、（68.278±6.485）pg/ml，
Z值分别为-2.73、-2.88，
P值均<0.01］和Scramble siRNA组［（661.783±42.094）pg/ml、（63.015±7.416）pg/ml，
Z值分别为-2.72、-2.81，
P值均<0.01］。STAT6 siRNA组小鼠鼻黏膜组织Eos计数为（29.132±4.163）/HPF，明显低于Vehicle组［（78.050±7.912）/HPF，
Z=-2.88，
P<0.01］和Scramble siRNA组［（73.864±8.671）/HPF，
Z=-2.72，
P<0.01］。STAT6 siRNA组小鼠鼻黏膜组织中STAT6蛋白相对表达水平为0.105±0.021，与Control、Vehicle及Scramble siRNA组（0.232±0.037、0.243±0.039、0.228±0.032）相比显著降低（
Z值分别为-2.25、-2.49、-2.56，
P值均<0.05）。与Vehicle组（0.613±0.046）和Scramble siRNA组（0.641±0.050）相比，STAT6 siRNA组p-STAT6蛋白相对水平（0.292±0.038）明显下降（
Z值分别为-2.81、-2.88，
P值均<0.01）。免疫荧光染色结果显示，p-STAT6主要位于鼻黏膜上皮细胞及炎性细胞的细胞核中，STAT6 siRNA组小鼠鼻黏膜中表达p-STAT6的绿色荧光弱于Vehicle及Scramble siRNA组。
结论:经鼻滴入STAT6 siRNA可下调鼻黏膜STAT6表达，降低p-STAT6水平，抑制ECRS产生。
鼻窦炎、嗜酸粒细胞、Th2免疫反应、信号传导和转录激活因子6、小干扰RNA
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苏州市科技计划项目SKJY2021084;The Program of Suzhou Science and Technology Planning ProjectSKJY2021084
2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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