10.3760/cma.j.cn115330-20220801-00473
首日悬浮法对于鼻咽癌类器官构建成功率的分析
目的:验证首日悬浮法对于提高鼻咽癌类器官(nasopharyngeal carcinoma-patient derived organoids,NPC-PDO)构建成功率的有效性。方法:收集2022年1月至7月广西医科大学附属肿瘤医院和广西医科大学第一附属医院初诊的14例鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者样本,男性患者13例,女性1例,年龄(43.0±12.0)岁。取其中3例患者的肿瘤样本消化成单细胞悬液后平均分成2组,同时采用直接接种法和首日悬浮法对比NPC-PDO的构建效果;取余下11例患者样本随机采用直接接种法或首日悬浮法进行NPC-PDO的构建。通过光学显微镜对比两种方法构建的NPC-PDO直径大小和成球数量;采用3D细胞活力检测试剂盒对比细胞活力;采用台盼蓝染色计算细胞存活率;对可成功传代5代以上且经病理学检测与来源组织一致的病例数进行统计;采用活细胞工作站观察悬浮过夜状态下细胞的动态变化情况。采用独立样本
t检验对2组计量资料进行比较,采用卡方检验对分类资料进行比较。
结果:相比于直接接种法,首日悬浮法构建的NPC-PDO直径和成球数都增加,且保持更高的细胞活性,同时,构建成功率明显提高(80.0%比16.7%,χ
2=4.41,
P<0.05),差异均有统计学意义。悬浮状态下部分细胞发生聚集现象并提高了增殖能力。
结论:首日悬浮法可以在样本量较少时提高NPC-PDO的培养成功率。
鼻咽肿瘤、鼻咽癌、类器官、3D细胞培养、首日悬浮法
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国家自然科学基金82160386;广西自然科学基金2021GXNSFAA075042;National Natural Science Foundation of China82160386;National Natural Science Foundation of Guangxi2021GXNSFAA075042
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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