内质网应激参与钙黏蛋白23基因突变小鼠耳蜗外毛细胞损伤的实验研究

摘要：

目的 探讨内质网应激参与钙黏蛋白23(Cadherin 23,Cdh23)基因突变小鼠耳蜗外毛细胞损伤的机制.方法 采用纯合型Cdh23基因突变小鼠(erl小鼠)为实验组,C57BL/6J小鼠(B6)为对照组,每组各70只.测试两组小鼠ABR阈值,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术检测细胞凋亡.通过实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹(Western blot)及免疫荧光染色,检测内质网应激标志物免疫球蛋白结合蛋白(immunoglobulin-binding protein, BiP)和核转录因子C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)在小鼠耳蜗中的表达及分布,观察CDH23蛋白在耳蜗外毛细胞的定位.结果 1月龄及3月龄erl小鼠8、16、32 kHz ABR阈值均显著高于对照组B6小鼠,差异具有统计学意义(P值均<0.05).erl小鼠耳蜗外毛细胞TUNEL阳性细胞率显著高于B6小鼠,差异具有统计学意义(t=11.291,P<0.01).Bip及Chop mRNA在erl小鼠耳蜗表达明显高于B6小鼠,BiP蛋白在erl小鼠耳蜗表达明显高于B6小鼠,差异具有统计学意义(P值均<0.05).B6小鼠耳蜗外毛细胞未检测到BiP及CHOP信号,而erl小鼠耳蜗外毛细胞细胞质中BiP及CHOP特异性高表达.CDH23蛋白在B6小鼠外毛细胞远离细胞核的顶端表达;在erl小鼠的耳蜗外毛细胞,突变型CDH23erl蛋白部分表达于远离细胞核的顶端,部分滞留于细胞质.结论 小鼠Cdh23基因突变导致CDH23蛋白质翻译异常,生成突变型CDH23erl蛋白,部分突变型蛋白转运障碍,滞留于内质网腔,引发内质网应激并最终导致外毛细胞损伤.

关键词：听觉丧失、感音神经性、内质网、毛细胞、听觉、外、细胞凋亡

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资助基金：国家自然科学基金青年基金81600809National Natural Science Foundation for Young Scientists of China81600809

在线出版日期：2018-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：110-117