miR-140-5p通过下调ADAM10表达对下咽癌细胞的迁移和侵袭能力的影响

摘要：

目的 分别检测miR-140-5p(微小RNA-140-5p)和ADAM10(去整合素金属蛋白酶10)在下咽癌组织中的表达,并探讨miR-140-5p对下咽癌FaDu细胞迁移和侵袭能力的影响及可能的调控机制.方法 应用real-time PCR(荧光定量PCR)检测miR-140-5p及ADAM10 mRNA在33例下咽癌患者肿瘤组织和癌旁组织中的表达;利用转染技术分别上调miR-140-5p、下调miR-140-5p和下调ADAM10的表达;采用transwell迁移和侵袭实验检测miR-140-5p上调、miR-140-5p下调和ADAM10下调对FaDu细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western blot技术检测33对临床标本和FaDu细胞ADAM10蛋白的表达.结果 MiR-140-5p在下咽癌肿瘤组织中明显下调(t=-4.016,P＜0.01),ADAM10 mRNNA及蛋白在下咽癌肿瘤组织中明显上调(t=3.960,P＜0.01;t=12.089,P＜0.01).实验组FaDu细胞干扰ADAM10表达后,ADAM 10在mRNA和蛋白水平较siRNA-NC阴性对照组明显下调(t=8.653,P＜0.05;t =5.191,P＜0.05).空白对照组和阴性对照组差异无统计学意义(P＞0.05).Transwell迁移和侵袭实验显示,hsa-mir-140-5p实验组细胞迁移和侵袭细胞数明显低于hsa-mir-NC阴性对照组(t=3.255,P＜0.05;t =2.942,P＜0.05),anti-mir-140-5p实验组细胞迁移和侵袭细胞数明显高于对照组(t=-13.521,P＜0.05;t=-6.223,P＜0.05),si-ADAM10实验组细胞迁移和侵袭细胞数明显低于对照组(t =4.759,P＜0.05;t =3.663,P＜0.05).ADAM10下调能够部分逆转miR-140-5p下调对细胞迁移和侵袭能力的促进作用.Western blot显示,hsa-mir-140-5p实验组ADAM10蛋白的表达量较对照组明显降低,Anti-mir-140-5p实验组ADAM10蛋白较对照组明显升高.结论 miR-140-5p在下咽癌肿瘤组织中低表达且与下咽癌患者的肿瘤T分期及淋巴结转移N分期显著相关,且ADAM10在肿瘤组织中高表达.MiR-140-5p能够调控ADAM10的表达,miR-140-5p抑制下咽癌细胞迁移和侵袭能力,可能是通过下调ADAM10蛋白实现的.MiR-140-5p可能成为下咽癌治疗的新靶点.

关键词：下咽肿瘤、微RNAs、ADAM10、肿瘤浸润

所属期刊栏目：51

在线出版日期：2016-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：189-196