微小RNA-519b-3p对人喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用及其机制

摘要：

目的 探讨微小RNA-519b-3p(miR-519b-3p)对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响及其在喉癌发生发展过程中的作用及机制.方法 通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)和流式细胞仪分别检测转染miR-519b-3p类似物前后Hep-2细胞生长和细胞周期的变化,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别在mRNA和蛋白水平检测细胞中相关基因和蛋白的表达.实时定量RT-PCR技术检测48对喉癌组织及癌旁组织中miR-519b-3p的表达水平.结果 喉癌组织中miR-519b-3p的表达水平明显低于癌旁组织(S△Ct=2.989,f =2.693,P＜0.01).miR-519b-3p类似物能显著抑制Hep-2细胞的增殖,使细胞周期被阻滞在G2/M期(10.29％±4.63％,(x)±s,t=4.395,P＜0.05),并明显减少S期细胞(7.56％±2.05％,t=3.555,P＜0.05),使细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin dependent kinase 1,CDKl)表达显著增加,而显著抑制CDK2和细胞周期蛋白A(Cyclin A)的表达.RT-PCR和Western blot结果显示,miR-519b-3p类似物在不影响HuR和环氧化酶-2(cyclooxgenase-2,COX-2)mRNA表达水平情况下,却明显下调其蛋白表达水平.结论 miR-519b-3p在喉癌组织中低表达,它可能作为抑癌因子通过翻译后抑制HuR和COX-2的表达而使细胞周期被阻滞在G2/M期,从而抑制细胞生长.

关键词：喉肿瘤、癌、鳞状细胞、微RNAs、细胞周期蛋白A、细胞系、肿瘤、细胞增殖

所属期刊栏目：49

分类号：R737.31;R285.5;R363.2

资助基金：浙江省医药卫生科技计划;宁波市重大择优委托项目;宁波市科技创新团队项目;宁波市自然科学基金

在线出版日期：2014-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：151-156