上皮细胞黏附因子对下咽癌FaDu细胞转移影响的研究

摘要：

目的 研究小干扰RNA(siRNA)干扰上皮细胞黏附因子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)表达对下咽癌FaDu细胞体外侵袭、迁移、克隆形成能力的影响,并分析其可能机制.方法 利用siRNA技术干扰FaDu细胞中EpCAM基因的表达;采用Transwell侵袭、迁移实验和平板克隆实验,分别检测干扰EpCAM表达对FaDu细胞侵袭、迁移及克隆形成能力的影响;借助Western blot检测干扰EpCAM表达对E-cadherin和β-catenin在细胞质及细胞骨架上表达的影响.结果 FaDu细胞转染EpCAM siRNA后,EpCAM在mRNA和蛋白水平表达较阴性对照组均显著下调(t =6.46,P＜0.05;t=10.25,P＜0.05).侵袭实验显示:EpCAM siRNA组每个视野下平均细胞数目为(26.33 ±3.71)个,较FaDu组(61.47 ±6.70)个及阴性对照组(54.13 ±6.51)个下降明显,差异有统计学意义(t =7.95,t =6.42,P＜0.05).迁移实验显示:EpCAM siRNA组每个视野下平均细胞数目为(79.87 ±8.44)个,低于FaDu组(167.53 ±11.49)个和阴性对照组(162.13±13.45)个,与阴性对照组相比差异有统计学意义(t =10.90,t=8.97,P＜0.05).平板克隆实验中,EpCAM siRNA组平均克隆形成数目为(78.00 ±5.57)个,低于FaDu组(177.30±16.50)个和阴性对照组(173.67±13.50)个,差异具有统计学意义(=9.78,=11.35,P＜0.05).Westem blot显示,EpCAM siRNA组E-cadherin和β-catenin在细胞骨架上表达水平显著升高,与阴性对照组相比差异均具有统计学意义(=4.58,P＜0.05;t =3.76,P＜0.05);而在细胞质中表达则显著降低,与阴性对照组相比差异有统计学意义(t =6.60,P＜0.05;t=8.20,P＜0.05);在总蛋白水平,E-cadherin和β-catenin表达无明显变化.结论 干扰FaDu细胞中EpCAM基因的表达,抑制细胞的侵袭、迁移和克隆形成能力,其机制可能与调节E-cadherin和β-catenin在细胞骨架和细胞质中的表达有关,EpCAM基因有可能成为下咽癌基因治疗的新靶点.

关键词：下咽肿瘤、RNA、小分子干扰、细胞黏附分子、抗原、肿瘤、细胞系、肿瘤

所属期刊栏目：48

分类号：R735.7;S828.1;R392.12

资助基金：山东省科技发展计划2010GHZ20202

在线出版日期：2014-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1022-1027