烟曲霉菌诱导大鼠呼吸道上皮细胞IKKα调控maspin蛋白表达的初步研究

摘要：

目的 研究烟曲霉诱导大鼠呼吸道上皮细胞时是否存在IκB激酶-α(IκB kinase-α,IKKα)调控maspin蛋白表达下调.方法 体外培养大鼠呼吸道上皮细胞(rat bronchial epithelial cells,REC),制备灭活的烟曲霉菌菌丝(Aspergillus fumigatus hyphae,AFH)悬液诱导REC细胞,以磷酸盐缓冲液(PBS)为对照,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测REC中maspin基因的表达,并通过免疫细胞化学技术观察maspin蛋白及IKKα在REC的表达情况.进一步制备浓度依次增高的AFH1～3悬液诱导REC细胞,Western Blot技术检测REC的maspin和IKKα蛋白表达.采用SPSS13.0软件进行方差分析和两变量的相关性分析.结果 RT-PCR检测显示AFH组与对照组的maspin蛋白的mRNA相对表达量分别为0.128±0.059和2.972±0.353,差异具有统计学意义(t=15.883 P＜0.05).免疫细胞化学结果显示,maspin蛋白在两组中均表达,其中AFH组呈弱阳性,而对照组呈中度阳性,综合计分两组差异有统计学意义(t=3.721 P＜0.05)；IKKα显色在AFH组中度阳性,在对照组弱阳性,综合计分差异有统计学意义(t =6.825 P＜0.05).Western Blot结果maspin 与β-actin的灰度比值对照组为0.912±0.023,AFH1～3组分别为0.607±0.030、0.476±0.019、0.416±0.017,组间差异有统计学意义(F=281.91,P＜0.05),且任意两组比较差异均有统计学意义；IKKα与β-actin灰度比值对照组为0.624 ±0.012,AFH1 ～3组分别为0.739±0.020、0.778±0.010、0.927 ±0.017,组间差异有统计学意义(F=200.91,P＜0.05),且任意两组比较差异均有统计学意义.两变量相关性分析结果显示,maspin蛋白表达与IKKα蛋白表达呈负相关关系(r=-0.911,P＜0.05).结论 AFH诱导大鼠REC中IKKα表达上调并伴有maspin蛋白表达下调.

关键词：丝氨酸蛋白酶抑制剂、舍平类、I-κB激酶、曲霉菌、烟、鼻窦炎、真菌病

所属期刊栏目：48

分类号：Q936;R735.2;R329.26

资助基金：国家自然科学基金;山西省归国留学基金

在线出版日期：2013-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：48-53