重组杆状病毒载体介导大鼠螺旋神经节细胞基因转染的研究

摘要：

目的 探讨重组杆状病毒(baculovirus,Bac)作为内耳螺旋神经节细胞基因转染载体的可行性及其转染特点.方法 应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的杆状病毒载体(Bac-GFP),以不同感染复数(multiplicities of infection,MOI)的病毒和不同浓度的丁酸钠转染大鼠螺旋神经节细胞,通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测细胞转染率和绿色荧光蛋白表达强度,并观察杆状病毒和丁酸钠对螺旋神经节细胞的毒性.结果 杆状病毒可以高效转染螺旋神经节细胞,转染效率达77.69%.Bac-GFP转染率和表达强度随着MOI和丁酸钠浓度的提高而提高.GFP在转染后6 h开始表达,第2天达到最高.重组杆状病毒MOI小于800以及丁酸钠终浓度小于或等于10 mmol/L时,对螺旋神经节细胞没有明显细胞毒性.结论 重组杆状病毒可以在体外高效安全转染内耳螺旋神经节细胞.

关键词：螺旋神经节、杆状病毒科、转染

所属期刊栏目：42

分类号：R3(基础医学)

资助基金：上海市科委资助项目044119744

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：939-942