抑制高迁移率族蛋白B1减少大鼠脊髓损伤后星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9表达的研究

摘要：

目的:研究抑制高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对大鼠脊髓损伤（SCI）后星形胶质细胞（AS）基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的作用及分子机制。方法:改良Allen打击法制作Sprague-Dawley（SD）大鼠SCI模型，使用丙酮酸乙酯（EP）或甘草甜素（GL）抑制HMGB1作用，将大鼠分为假手术组、SCI组、SCI+EP（50 mg/kg）组、SCI+GL（100 mg/kg）组，观察大鼠脊髓AS的胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、MMP-9的蛋白表达。体外培养SD大鼠脊髓AS，建立氧糖剥夺/复氧（OGD/R）模型，观察OGD 6 h/R 6、12、24、48 h后脊髓AS的MMP-9蛋白表达，以表达最高的时间点用于后续实验为OGD/R组；通过HMGB1 shRNA或EP抑制HMGB1，观察HMGB1对OGD/R处理AS的MMP-9蛋白表达的作用；并使用Toll样受体4（TLR4）、
β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)及核转录因子-
κB（NF-
κB）的抑制剂，观察HMGB1/TLR4/TRIF/NF-
κB通路在OGD/R处理AS的MMP-9蛋白表达中的作用机制。
结果:Western blot结果表明，SCI后1 d大鼠脊髓MMP-9蛋白表达增高，SCI+EP组和SCI+GL组大鼠脊髓MMP-9蛋白表达较SCI组显著减少，差异均有统计学意义（
P<0.001）。免疫荧光结果表明，GFAP与MMP-9蛋白在SCI后脊髓中共定位表达，SCI+EP组和SCI+GL组大鼠脊髓的GFAP、MMP-9蛋白表达较SCI组显著减少，差异均有统计学意义（
P<0.05）。由于在体外培养的脊髓AS中，OGD 6 h/R 12 h的MMP-9蛋白表达较正常组和OGD 6 h/R 6、24、48 h显著增加，以OGD 6 h/R 12 h为OGD/R组。OGD/R+HMGB1 shRNA组和OGD/R+EP组中AS中的MMP-9蛋白表达较OGD/R组显著减少，差异均有统计学意义（
P<0.001）。抑制TLR4、抑制TRIF或抑制NF-
κB均可显著减少OGD/R的AS的MMP-9蛋白表达，差异均有统计学意义（
P<0.001）。
结论:抑制HMGB1作用减少大鼠SCI后脊髓AS的MMP-9蛋白表达，并减少OGD/R处理后AS的MMP-9蛋白表达。HMGB1通过TLR4/TRIF/NF-
κB信号通路调节OGD/R处理的AS中的MMP-9蛋白表达。

关键词：脊髓损伤、星形细胞、HMGB1蛋白质、Toll样受体4、核转录因子- κB 、基质金属蛋白酶-9

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资助基金：国家自然科学基金81870976;山西省卫生健康委员会重点攻关专项2020XM27;National Natural Science Foundation of China81870976;Key Projects of Shanxi Provincial Health Commission2020XM27

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：711-717