10.3760/cma.j.issn.1671-7600.2013.06.015
一体化灌注法体外构建活化人工骨的实验研究
目的 探讨一体化灌注法——灌注接种-灌注培养体外构建活化人工骨的效果. 方法 以多孔β-磷酸三钙(β-TCP)支架为载体,采用自行设计的灌注式生物反应器进行人胚成骨细胞的PSPC,并设静态接种-静态培养(sssc)和静态接种-灌注培养(SSPC)为对照组,通过葡萄糖日耗量、细胞活力测定、扫描电镜(SEM)、组织学观察与形态计量分析等检测方法,比较3种构建方法的细胞增殖和分布情况. 结果 培养2、4、6、8d,3组细胞葡萄糖日耗量均随培养时间的延长而增加,SSPC组和PSPC组均明显高于SSSC组,差异有统计学意义(P<0.05),培养6d内PSPC组明显高于SSPC组,差异有统计学意义(P<0.05),培养8d时两组葡萄糖日耗量差异无统计学意义(P>0.05).SSPC组(1.597±0.103)和PSPC组(1.668±0.129)细胞活力差异无统计学意义(P>0.05),但均明显高于SSSC组(0.347±0.034),差异有统计学意义(P<0.05).SEM及组织学观察显示SSSC组细胞仅分布在支架周缘,而SSPC组和PSPC组细胞在支架内部及周边均有分布,SSPC组、PSPC组细胞占孑L率(18.66%±4.41%、19.34%±3.55%)均明显高于SSSC组(4.07%±1.78%),差异有统计学意义(p<0.05). 结论 一体化灌注法体外构建活化人工骨的效果优于传统的静态方法;与静态接种-灌注培养相比,一体化灌注法可显著促进培养初期细胞增殖从而加快组织构建速度.
组织工程、生物反应器、组织支架、细胞接种、灌注
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National Nature Science Foundation31170913;国家自然科学基金31170913
2013-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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