生长相关蛋白-43影响神经细胞分裂方向作用的研究

摘要：

目的研究生长相关蛋白-43（growth associated protein-43，GAP-43）与G蛋白对神经细胞分裂方向的调控，探讨GAP-43参与神经发生的机制。
<br>　　方法6只C57BL／6J GAP-43高表达的转基因孕鼠（E13.5 d和E17.5 d的胎鼠均为24只）为实验组，6只野生型孕鼠（E13.5 d和E17.5 d的胎鼠均为24只）为对照组。分别取E13.5 d的3只实验组及对照组胎鼠，脑室区进行免疫荧光染色测定GAP-43的表达位置；再分别取E13.5 d的12只实验组及对照组胎鼠，向脑中加入裂解液分别提取膜蛋白和细胞质蛋白，通过Western blot测定GAP-43的表达位置及表达量；取E17.5 d的3只GAP-43高表达的转基因胎鼠的鼠脑进行GAP-43和G蛋白的免疫荧光共染色，观察二者的共定位情况；取E17.5 d的9只GAP-43高表达的转基因胎鼠的鼠脑进行免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，co-IP）检测GAP-43与Gαi间的相互作用。取E13.5 d和E17.5 d的9只实验组胎鼠计数转基因胚胎鼠脑中神经前体细胞（neuro progenitor cel，NPC）中沿水平和垂直不同方向分裂的细胞数量，并与对照组小鼠进行对照。
<br>　　结果 E13.5 d实验组胎鼠的GAP-43蛋白的表达量高于对照组（P<0.05）；GAP-43特异性表达于细胞膜上；免疫荧光共染色结果表明GAP-43与Gαi共定位于细胞膜上，进一步通过co-IP证明GAP-43和Gαi相互结合；E13.5 d时，转基因组与对照组相比，细胞沿水平、中间和垂直角度分裂的细胞数量差异有显著性（P<0.05）。
<br>　　结论 GAP-43可调控神经细胞分裂方向，这可能是GAP-43参与神经发生的机制。本研究为进一步研究GAP-43对卒中后神经损伤修复的作用机制提供基础。

关键词：生长相关蛋白、转基因小鼠、Gαi、细胞分裂平面、神经发育

资助基金：国家自然科学基金81200931

在线出版日期：2015-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：128-134