基于Cx43研究产前应激对子代大鼠睾丸发育的影响及左归丸干预作用

摘要：

基于缝隙连接蛋白 43(connexin 43,Cx43)研究产前应激大鼠影响子代睾丸发育的机制及左归丸的防治作用.制备SD孕鼠 40 只,随机分为空白对照组、模型组、左归丸高剂量组(18.9 g·kg-1)、左归丸低剂量组(9.45 g·kg-1)、维生素E组(1.44 mg·kg-1).除空白对照组以外,其余各组通过慢性不可预测轻度应激法复制产前应激(prenatal stress,PS)孕鼠模型.采用糖水偏好实验、旷场实验、酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测糖皮质激素(glucocorticoids,GC)含量评估PS孕鼠模型;ELISA法检测血清甲状腺素 4(thyroxine 4,T4)、睾酮(testosterone,T)、促卵泡生长激素(follicle-stimulating hormone,FSH)评估肾虚状态及性激素水平;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色评估睾丸生殖细胞状况;全自动精子分析仪检测精子质量;免疫荧光双染检测子代大鼠睾丸Cx43 蛋白、促卵泡激素受体(follicle-stimulating hormone re-ceptor,FSHR)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法(real-time fluorescent quantitative PCR,RT-PCR)检测Cx43、促卵泡生长激素受体(FSHR)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)基因mRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot,WB)法检测子代大鼠睾丸Cx43、PI3K、FSHR、Akt蛋白表达.PS诱发子代大鼠睾丸发育障碍,HE染色结果显示,出生当天子代雄鼠睾丸曲精小管数量减少,血清FSH升高,睾丸组织Cx43 水平降低,60 日龄子代雄鼠睾丸生精功能降低,精子质量下降,血清FSH升高,T降低,睾丸组织Cx43、FSHR、PI3K、Akt蛋白及mRNA水平均降低;而给予左归丸防治后对子代大鼠上述睾丸发育异常及功能障碍均有改善.综上,左归丸可能通过激活PI3K/Akt通路调节睾丸Cx43表达改善PS对子代大鼠睾丸发育及生精功能的影响.

关键词：产前应激、连接蛋白43、子代、左归丸、睾丸发育

所属期刊栏目：49

分类号：R285.5;R714.5;R587.1

资助基金：国家自然科学基金;湖北省中医药管理局中医药重点项目;湖北省教育厅科学研究计划项目;湖北省中医药管理局中医药指导性项目;武汉中青年名中医项目;湖北名师工作室项目;校级科研平台项目;湖北中医药大学青苗计划项目

在线出版日期：2024-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：197-207