藁本内酯通过抑制铁死亡减轻PC12细胞OGD/R损伤的分子机制研究

摘要：

该研究旨在从铁死亡角度探讨中药当归挥发油主要活性成分藁本内酯减轻PC12 细胞氧糖剥夺再灌注(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)损伤的分子机制.体外构建 OGD/R模型,于再灌注时加入藁本内酯 12 h后,采用CCK-8法检测PC12 细胞活力;DCFH-DA免疫荧光染色法分析细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平变化;Western blot法检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶 4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、转铁蛋白受体 1(transferrin receptor 1,TFR1)、溶质载体家族7 成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)以及铁自噬相关蛋白核受体共激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)、铁蛋白重链 1(ferritin heavy chain 1,FTH1)、微管相关蛋白 1 轻链 3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达水平;细胞免疫荧光染色法分析LC3 蛋白的荧光强度;化学发光法检测还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和铁(Fe)的含量;过表达NCOA4 基因观察藁本内酯对铁死亡的作用.结果显示,与OGD/R组相比,藁本内酯可显著提高 OGD/R损伤的 PC12 细胞活力,抑制 ROS 释放,降低 Fe、MDA 含量以及TFR1、NCOA4、LC3 的表达水平,提高GSH含量以及GPX4、SLC7A11、FTH1 的表达水平.过表达铁自噬关键蛋白NCOA4 后,藁本内酯抑制铁死亡的作用部分被抵消,表明藁本内酯可能通过阻断铁自噬过程进而抑制铁死亡,最终发挥减轻PC12 细胞OGD/R损伤的作用.该实验初步证明藁本内酯减轻PC12 细胞OGD/R损伤的作用机制可能与其抑制铁自噬参与的铁死亡过程有关.

关键词：藁本内酯、氧糖剥夺再灌注(OGD/R)、PC12细胞、铁自噬、铁死亡

所属期刊栏目：48

分类号：TP27;R737.31;R542.22

资助基金：国家自然科学基金;安徽省高校自然科学研究重大项目;安徽省高校学科拔尖人才学术项目;安徽省高校研究生科学研究项目

在线出版日期：2023-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：3046-3054