丹参新酮对白血病THP-1细胞增殖与凋亡的影响

摘要：

研究丹参新酮(miltirone)对人急性髓系白血病THP-1细胞的细胞毒作用及其机制.通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)筛选出丹参新酮活性成分及其对应靶点,利用UniProt数据库将靶蛋白转化成基因;利用GeneCards和DisGeNET数据库收集急性白血病疾病相关基因;运用Venny 2.1构建韦恩图并得到交集靶点;利用STRING数据库和Cytoscape 3.8.2软件构建蛋白相互作用(PPI)网络;选取对数生长期的THP-1细胞,用DMSO,2.5、5、10、15及20 μmol·L-1 miltirone处理24 h;采用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记法检测细胞增殖;Annexin V-PE/7AAD双染流式细胞术检测凋亡率,吖啶橙染色观察细胞形态;实时荧光定量PCR(qPCR)检测 NCOA2、PARP1、Bax、Bcl-2、caspase-3 mRNA 的表达;检测 caspase 抑制剂 Z-VAD-FMK 对 miltirone 诱导凋亡的影响.筛选出26个miltirone靶蛋白,急性白血病疾病相关基因1 046个,6个潜在作用靶点与急性白血病相关.流式结果显示,10 μmol·L-1 miltirone可显著抑制THP-1细胞增殖并促进凋亡;吖啶橙染色可见细胞萎缩、细胞核碎裂、染色体聚集等典型的凋亡形态学改变;NCOA2、PARP1 mRNA表达水平降低,Bax/Bcl-2比例增大,促凋亡蛋白caspase-3活性增强.Z-VAD-FMK 能减弱miltirone诱导凋亡的作用.研究结果表明miltirone能抑制THP-1细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与下调NCOA2、PARP1基因的表达,Bax/Bcl-2比值增大,激活促凋亡因子caspase-3有关.

关键词：白血病、丹参新酮、THP-1细胞、细胞凋亡、细胞增殖

所属期刊栏目：47

分类号：R737.9;R2;R9

资助基金：山东大学临床研究重点项目2020SDUCRCA010

在线出版日期：2022-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2541-2546