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10.19540/j.cnki.cjcmm.20200901.401

葛根芩连汤对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织FASN酶活性及其基因表达和甲基化水平影响的初步研究

引用
该研究旨在探讨葛根芩连汤(Gegen Qinlian Decoction,GQD)对高脂饲料诱导的胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠脂肪组织脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)酶活性、基因的mRNA表达和甲基化的作用.采用60%脂肪供能的高脂饲料持续喂养雄性SD大鼠建立胰岛素抵抗大鼠模型,然后将建模成功的大鼠随机分为5组并灌胃给药16周,各组每日给药剂量分别为:GQD低剂量组(GQDL) 1.65 g·kg-1,GQD中剂量组(GQDM)4.95 g·kg-1,GQD高剂量组(GQDH) 14.85 g.kg-1,罗格列酮(rosiglitazone,RGN)组5 mg·kg-1,胰岛素抵抗模型对照组(IR)和空白对照组(control,C)给予水10 mL.kg-1.取附睾脂肪组织用比色法检测FASN酶活性;用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,Q-PCR)法测定Fasn mRNA水平;用亚硫酸氢盐测序PCR法(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测Fasn基因+313 +582片段CpGs甲基化水平.实验发现高脂饲料喂养极显著降低大鼠脂肪组织Fasn基因表达水平(P<0.01);IR组大鼠FASN酶活性和基因总CpGs甲基化水平有下降趋势;GQD低、中剂量组显著提高FASN酶活性(P<0.05);GQD低剂量组显著升高胰岛素抵抗大鼠脂肪组织Fasn基因片段+313~+582的总CpGs甲基化水平(P<0.05),GQD中剂量组极显著升高+506和+508处CpG位点甲基化水平(P<0.01)以及显著升高转录因子Zfp161(zinc finger protein 161)结合位点上CpGs甲基化水平(P<0.05).相关性分析发现+442位点CpG甲基化频率与Fasn基因表达有极显著的正相关关系(P<0.01,r=0.735);+345,+366位点CpG甲基化频率与FASN酶活性分别有显著和极显著的正相关关系(P<0.05,r=0.479;P<0.01,r=0.640).该研究表明,GQD能逆转胰岛素抵抗大鼠脂肪组织FASN酶活性和Fasn甲基化变化,其中+506和+508处CpG位点可能是GQD的重要作用靶点.而且Fasn基因的+345和+366位点CpG甲基化水平可能与FASN酶活性有关,+442位点CpG甲基化水平可能与mRNA水平密切相关.另外,GQD未显著改变mRNA水平但能有效逆转FASN酶活性,提示可能存在GQD对Fasn转录后表达过程的调节作用.

葛根芩连汤、胰岛素抵抗、脂肪酸合成酶、DNA甲基化、转录因子

S813.3;R714.5;R587.1

国家自然科学基金;国家自然科学基金;江西省自然科学基金;江西省教育厅科技项目;江西省教育厅科技项目;江西中医药大学校级研究生专项资金项目;江西中医药大学校级大学生创新创业训练计划项目

2021-04-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共8页

398-405

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