多肽壳聚糖川芎嗪纳米粒逆转肿瘤细胞多药耐药作用研究

摘要：

该实验制备多肽壳聚糖川芎嗪纳米粒(pEGF-CS-TMP-NPs),研究其逆转肿瘤细胞多药耐药作用与机制.通过离子交联法制备pEGF-CS-TMP-NPs,并考察纳米粒理化特性.Western blot法检测MCF-7,MCF-7/ADR,K562,K562/ADR 4种细胞表皮生长因子受体(EGFR)和耐药相关蛋白P-gp的表达水平.选择MCF-7/ADR和K562/ADR作为细胞模型,MTT法检测pEGF-CS-TMP-NPs的细胞毒作用,测定细胞对阿霉素的耐药倍数,测定pEGF-CS-TMP-NPs对阿霉素耐药的逆转指数,考察pEGF-CS-TMP-NPs对阿霉素抗肿瘤的增敏作用.MCF-7/ADR和K562/ADR细胞分别给予pEGF-CS-TMP-NPs后Western blot法检测细胞P-gp表达水平的变化.HPLC测得pEGF-CS-TMP-NPs的包封率为37. 66％±0.53％,载药量为3.25％±0.34％.激光粒度仪测定纳米粒的粒径为(150. 50±9.3)nm,分散度为0.059±0.007,Zeta电位为(19.30±2.02) mV.透射电镜观察纳米粒形态成球形,分散均匀.Western blot结果显示EGFR在MCF-7和MCF-7/ADR细胞中呈现阳性表达,而在K562和K562/ADR细胞中呈现阴性表达;P-gp在MCF-7/ADR和K562/ADR 2种耐药细胞中呈现高表达,而在MCF-7和K562 2种细胞中呈现阴性表达.pEGF-CS-TMP-NPs对MCF-7/ADR和K562/ADR 2种耐药细胞毒作用较弱.MCF-7/ADR细胞对阿霉素的耐药倍数为108.36倍,K562/ADR细胞对阿霉素的耐药倍数大于100倍.pEGF-CS-TMP-NPs的IC85作为给药浓度时,MCF-7/ADR和K562/ADR细胞的逆转指数分别为3. 68和1. 87,存在明显差异.pEGF-CS-TMP-NPs能增强阿霉素对MCF-7/ADR细胞的敏感性明显高于K562/ADR细胞,而在MCF-7/ADR细胞中该作用与pEGF-CS-TMP-NPs的浓度成正相关.Western blot结果显示2种耐药细胞给予pEGF-CS-TMP-NPs处理后,P-gp在MCF-7/ADR细胞中的表达水平下降明显,而在K562/ADR细胞中的表达无明显变化.实验结果说明本研究制备的pEGF-CS-TMP-NPs对EGFR高表达的MCF-7/ADR细胞具有主动靶向作用,且能有效的逆转MCF-7/ADR细胞的多药耐药,其主动靶向作用与纳米粒的多肽修饰有关,而逆转肿瘤MDR的机制可能是通过下调P-gp表达水平实现的.

关键词：川芎嗪、表皮生长因子受体、纳米粒、逆转多药耐药、肿瘤细胞

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资助基金：辽宁省科学技术计划项目;大连市科技计划项目

在线出版日期：2021-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：5487-5494