10.19540/j.cnki.cjcmm.20190312.002
汉黄芩苷调控NLRP3/SOCS3-TLR4-NF-κB炎症通路改善肝细胞胰岛素抵抗的研究
该实验研究汉黄芩苷对抗炎改善肝细胞胰岛素抵抗(IR)的降糖作用及相关抗炎分子机制.1×10-9 mol· L-1胰岛素和3.75×10-6mol·L-1地塞米松联合诱导48 h,建立稳定IR-HepG2细胞模型.采用葡萄糖氧化酶法在不同时间点(30,36,48,54 h)检测1,5,10,20,50 μmol· L-1汉黄芩苷干预IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量的变化,确定最佳起效时间点;蒽酮法检测细胞内糖原含量;CCK-8法检测各浓度汉黄芩苷对细胞活力的影响;Western blot法分别检测IR-HepG2细胞炎症小体隐热蛋白3(NLRP3)、细胞因子信号转导抑制蛋白3(SOCS3)、Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB (NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、瘦素(leptin)、瘦素受体(Ob-R)、磷酸化胰岛素受体底物2[p-IRS2(Ser731)]、胰岛素受体底物2(IRS2)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶p85[p-PI3K(Tyr607)]、磷脂酰肌醇3-激酶p85[PI3K(p85)]、磷酸化蛋白激酶B[p-Akt(Ser473)]、蛋白激酶B(Akt)和葡萄糖转运蛋白1/2/4 (GLUT1/2/4)的蛋白含量.结果 显示,最佳起效时间点为48 h.与IR模型组比较,20和50 μmol·L-1汉黄芩苷明显上调IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量(P＜0.001).20和50 μmol· L-1汉黄芩苷干预48 h增加IR-HepG2细胞糖原含量,且50 μmol· L-1差异极其显著(P＜O.001).各浓度汉黄芩苷对细胞活力均没有明显影响.汉黄芩苷明显抑制炎症通路中重要核转录因子NLRP3,SOCS3,TLR4和NF-κB,并减弱下游炎症效应因子IL-1β,IL-6和TNF-α的表达.除此之外,汉黄芩苷下调受SOCS3调控的leptin水平,激活胰岛素降糖通路中Ob-R,IRS2,p-PI3K/PI3K (p85),p-Akt/Akt和GLUT1/2/4蛋白表达.汉黄芩苷可促进HepG2细胞葡萄糖摄取和增加糖原合成改善肝IR,其降糖机制可能与调控NLRP3/SOCS3-TLR4-NF-κB炎症通路降低肝IR细胞炎症因子表达,激活胰岛素降糖通路来加强葡萄糖摄取和利用相关.
汉黄芩苷、胰岛素抵抗、炎症信号通路、胰岛素信号通路
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国家自然科学基金项目;江西省自然科学基金项目;江西省卫生厅中医药科技计划项目
2020-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
4504-4510
