利用体外靶点效率检测指导丹参SmPAL1基因的CRISPR/Cas9载体构建
为定向编辑丹参苯丙烷代谢途径中关键酶基因SmPAL1构建CRISPR/Cas9载体,通过在线软件设计CIRSPR/Cas9靶位点,采用体外酶切法进行体外靶点效率检测,筛选活性高的序列,构建到CRISPR/Cas9载体中.设计了3个可能的CRISPR/Cas9靶位点(SmPAL1-g1,SmPAL1-g2,SmPAL1-g3),通过体外靶点效率检测,其活性分别为53.3％,76.6％,10.0％,将筛选出活性较高的2个靶位点SmPAL1-g1和SmPAL1-g2构建到载体VK005-03中并命名为VK005-03-g1和VK005-03-g2.测序结果显示,设计的2个CRISPR/Cas靶位点全部插入到VK005-03中,载体构建成功.
丹参、苯丙氨酸解氨酶、CRISPR/Cas9、基因编辑、靶点效率检测
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山东省现代农业产业技术体系项目SDAIT-20-04;山东省重点研发计划项目2017CXGC1302,2016ZDJS07A22;国家重点研发计划项目2017YFC1702705
2019-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
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