oleosin-rhFGF9融合蛋白的红花表达及其毛发再生、创伤修复研究
利用红花表达成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor 9,FGF9)重组融合蛋白,研究其对毛发生长及创伤修复的作用,为红花作为植物反应器提供基础并对FGF9融合蛋白毛发及创伤商业化应用奠定基础.通过冻融法将鉴定的pOT-Bar-oleosin-rhFGF9质粒转入农杆菌EHA105中,农杆菌介导法将oleosin-rhFGF9基因转入红花子叶中,经红花组织培养、Basta筛选获得转基因再生苗,嫁接法,PCR试验验证,扩繁,获得转基因T3红花种子.Western blot法分析及ELISA定量融合蛋白含量为0.09%.在质量浓度为60 μg·L-1时,转基因红花油体促NIH/3T3细胞增殖较好,且有一定剂量依赖性.C57BL/6小鼠60只,分别建立脱发模型和创伤模型,分别为空白组(PBS或生理盐水)、阴性组(野生型红花种子油体,60 g·L-1)、阳性组(FGF9,0.054 g·L-1)、低剂量组(转基因红花油体,10 g·L-1)和高剂量组(转基因红花油体,60 g·L-1),隔天涂抹1次,每次100 μL,15 d后取皮,固定包埋进行组织学分析.小鼠毛发实验结果表明各组小鼠毛发长势良好,其中高剂量组小鼠毛发浓密,再生毛发数均较阳性组有显著效果;创伤实验愈合明显,阳性组、高剂量组、低剂量组愈合效果较空白组均显著,且在第5天,高剂量组愈合效果显著优于阳性组.该实验成功转化红花,获得了oleosin-rhFGF9融合蛋白表达的T3转基因红花,其具有促进毛发再生和创伤修复的作用.
成纤维细胞生长因子9、红花、毛发、创伤
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国家高技术研究发展计划863项目2011AA100606;国家自然科学基金项目31501366;吉林省科学技术发展项目20150623024TC-11,20170520089JH
2018-12-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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