苦豆子遗传转化体系建立及SaLDC启动子缺失分析

摘要：

药用植物遗传转化体系的建立对其功能基因研究具有重要意义,该研究在已有苦豆子再生体系的基础上,对农杆菌菌液浓度、农杆菌侵染时间、农杆菌与苦豆子愈伤组织的共培养时间、愈伤组织预培养时间、乙酰丁香酮添加方式和乙酰丁香酮浓度6个遗传转化因子进行优化,结果表明在预培养15 d的苦豆子愈伤组织中农杆菌菌液浓度A600为0.9、侵染时间15 min、农杆菌与愈伤组织共培养48 h、并在侵染液中添加AS 200 μmol·L.-1时,GUS瞬时转化效率高达83.33％.以苦豆子基因组DNA为模板克隆获得SaLDC上游1 260 bp的启动子序列(GenBank登录号KY038928),将不同长度(310,594,765,924,1 260 bp)的启动子缺失片段分别与GUS报告基因融合,构建的植物表达载体经农杆菌介导转化苦豆子愈伤组织,GUS瞬时表达结果显示,5个不同长度的SaLDC启动子片段均可驱动GUS在苦豆子愈伤组织中的表达,表明克隆所得的SaLDC启动子具有启动活性,以310 bp的片段启动活性最强,为进一步分析该启动子功能奠定了基础.

关键词：苦豆子、赖氨酸脱羧酶(LDC)、启动子基因、GUS瞬时表达、功能分析

所属期刊栏目：42

分类号：S88;R3

资助基金：宁夏回族自治区自然科学基金项目NZ14033;宁夏大学研究生创新项目GIP201651

在线出版日期：2017-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1853-1859