丹参素靶向乙肝病毒逆转录酶抗乙肝及抗原表达影响机制研究

摘要：

该文采用MTT法测定丹参素对转染人肝癌细胞株(HepG2)的2.2.15细胞活性的抑制作用,通过间接荧光标记法测定细胞内活性氧水平的变化;采用ELISA法测定细胞上清乙肝表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)水平,采用荧光定量PCR法检测HBV DNA水平;利用酶抑制动力学方法,研究了丹参素对HBV RT的抑制作用;最后利用圆二色谱法监测丹参素对HBV逆转录酶二级结构的影响.结果显示丹参素能够对HepG2.2.15细胞的生长起到良好的抑制作用,半抑制浓度IC50为(15.35±2.43)μmol·L-1;丹参素能显著抑制HBsAg和HBeAg表达,同时对HBV DNA复制具有抑制作用;此外,丹参素是一种有效的HBV逆转录酶抑制剂[半抑制浓度IC50为(21.32±2.43)μmol·L-1],荧光标记法检测,细胞内活性氧水平随着丹参素呈浓度依赖性升高;圆二色谱分析表明丹参素诱导HBV逆转录酶的构象发生部分改变,α-螺旋含量逐渐增加.结果表明丹参素能够通过结合HBV逆转录酶,诱导酶的结构变得紧密,而不利于活性中心的形成,最终使HBV逆转录酶活性降低.而这种诱导酶的活性降低直接影响到乙肝病毒DNA的复制,加之抗原水平的降低,增加了丹参素抗乙肝病毒的药效.

关键词：丹参素、HepG2.2.15细胞、乙肝病毒逆转录酶、活性氧、二级结构、抑制作用

所属期刊栏目：41

资助基金：河南省医学科技攻关计划项目201303106

在线出版日期：2016-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1297-1301