雷公藤MCT基因的全长克隆与表达分析
根据雷公藤转录组数据提供的基因片段设计特异引物,采用全长PCR方法克隆TwMCT全长cDNA,分析序列同源性,预测TwMCT蛋白结构,并进行序列多重比对和构建系统进化树分析;采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR),以actin为内参,分析雷公藤悬浮细胞受茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后0~ 72 hTwMCT基因的相对表达量.克隆得到全长1 318 bp TwMCT全长cDNA,具有完整编码框,编码311个氨基酸,蛋白相对分子质量为34.14 kDa,理论等电点为8.65;RT-qPCR结果表明该基因受MeJA诱导后表达逐渐上升,在24h时达到最高值.克隆雷公藤TwMCT全长cDNA和分析表达特性,为进一步研究该基因的功能和雷公藤次生代谢调控提供了基因元件.
雷公藤、2-C-甲基-D-赤藻醇-4-磷酸胱氨酰转移酶(MCT)、克隆、表达分析
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国家自然科学基金项目81325023,81422053,81373906;全国优秀博士学位论文作者专项201188
2016-04-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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