木犀草苷人工抗原合成及免疫原性鉴定
金银花是常用大宗中药材之一,市场流通量大,但存在较多质量问题,建立一种金银花质量快速检测方法具有重要意义.木犀草苷是其质量控制指标之一,目前木犀草苷的含量检测主要以仪器检测为主,无法满足简单、快速、高通量的需求.酶联免疫检测法(ELISA)则具有灵敏度高、操作简单、设备仪器需求少、通量高等优点,是实现中药材有效成分快速检测的有效手段之一.该研究以木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷为原料,通过活泼酯法,分别与牛血清白蛋白(BSA)及鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原及包被抗原;紫外分光光度法检测半抗原与载体蛋白的偶联比,分别为3.7∶1 (LG-BSA)和1.0∶1(LG-OVA);免疫原(LG-BSA)免疫Bal b/c雌性小鼠,制备抗血清,ELISA检测抗血清效价并建立血清特异性标线.结果显示血清效价>2000,以抗血清建立特异性标线,IC50=298.7 μg·L-,标线范围18.4~4 852.4 μg·L-1,表明所制备的完全抗原免疫原性良好.
木犀草苷、人工抗原、免疫原性、酶联免疫吸附检测法
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国家自然科学基金项目81373959;国家中医药行业科研专项201407003
2016-04-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
4359-4363