基于熔解曲线分析技术的木通类药材的分子鉴别

摘要：

高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)是一种主要用于基因分型和突变扫描的分子诊断技术,在中药真伪鉴定中有着广泛应用前景.该文将高分辨率熔解曲线技术应用于木通药材的鉴别,即选择trnH-psbA通用引物,在退火温度为58℃,35个循环数的条件下,建立正品木通药材的熔解曲线模型,并筛选确定其DNA模板浓度、引物浓度、Mg离子浓度的适宜范围.结果表明,在DNA质量浓度为5～125 mg·L-1、引物浓度0.4 μmol·L-1、Mg离子浓度2.0 mmol·L-1的条件下,木通药材的熔解曲线为双峰,其Tm为(81.84±0.16),(85.28 ±0.16)℃;川木通熔解曲线为单峰,其Tm为(83.22 ±0.19)℃;关木通熔解曲线为双峰,其Tm为(81.67±0.14),(84.24 ±0.10)℃.该方法可以实现简单、快速、高通量、可视化的的木通类药材的鉴定.

关键词：高分辨率熔解曲线、木通、分子鉴定

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资助基金：中医药行业科研专项201407003

在线出版日期：2015-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2304-2308