太子参药材的快速分子鉴定

摘要：

为建立一种简便快捷的太子参分子鉴定方法,对太子参药材及其混伪品的rDNA-ITS片段进行比对分析,找出特异性片段,设计太子参鉴别引物,并优选扩增条件,扩增产物经100×SYBR Green Ⅰ染色后紫外光下观察.结果显示,PCR扩增反应液(包括DNA Taq聚合酶预混液5.5 μL,Tzs-2F,Tzs-2R各10 pmol,DNA模板20～ 80 ng,双重灭菌蒸馏水加至25μL)经95℃预变性1 min,95℃变性5 s,56℃退火延伸15 s,30个循环,72℃后延伸30 s后,在扩增产物中加入1μL100×SYBR Green Ⅰ混匀后于紫外光下呈绿色荧光的为太子参,混伪品无绿色荧光出现.40 min内即可完成DNA提取、扩增等整个鉴定过程.该方法能特异性扩增太子参DNA,紫外光下肉眼观察即可鉴定药材的真伪,且操作简捷、结果准确、利于推广,可为快速鉴定中药材的真伪提供参考.

关键词：太子参、分子鉴定、特异性PCR、SYBR Green Ⅰ

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资助基金：中医药行业科研专项201407003;贵州省中药现代化科技产业研究开发专项黔科合ZY字[2013]3001号;贵州省教育厅普通高等学校特色重点实验室建设黔教合KY字[2013]108号

在线出版日期：2014-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：3689-3694