刺五加钙调蛋白基因的克隆及内生真菌对其表达的影响

摘要：

目的:克隆刺五加的钙调蛋白( calmodulin,CaM)基因,并分析内生真菌对其表达的影响.方法:采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆刺五加CaM基因的全长cDNA序列.通过RT-PCR法检测可显著提高刺五加皂苷含量的内生真菌菌株P116-1a,P116-1b,P109-4,P312-1对CaM表达的影响.结果:刺五加CaM基因的cDNA全长为856 bp,开放阅读框长450 bp,编码149个氨基酸的蛋白,与人参Panax ginseng和胡萝卜Daucus carota等物种的CaM同源性均高达100％.RT-PCR的结果显示,内生真菌可显著提高刺五加CaM基因的表达量(P＜0.05),最大表达量出现在菌株P109-4回接90 d时,达对照的2.96倍.结论:首次克隆并报道了刺五加CaM的cDNA全长序列,并证实内生真菌可显著提高刺五加CaM基因的表达量,为阐明内生真菌提高刺五加三萜皂苷含量的机制奠定了基础.

关键词：刺五加、钙调蛋白、克隆、表达分析

所属期刊栏目：37

分类号：R379.4(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30701086;河北省自然科学基金C2009001252;河北省自然科学基金-石药集团医药联合项目研究基金H2012401006

在线出版日期：2012-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2267-2271